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第一部分超声微泡介导P53质粒对宫颈癌Hela细胞株转染的最优参数选择目的:探讨超声微泡介导P53质粒转染宫颈癌Hela细胞的最优转染参数。方法:采用形态学观察Hela细胞生长情况;用MTT比色法检测不同超声条件对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制率,由此初筛出的超声条件介导P53转染Hela细胞,最终确定超声微泡的最优参数。结果:1.超声辐照时间30s,强度0.5、0.75、1W/cm2时,细胞存活率分别为(81.19±2.00)%、(77.61±1.93)%、(61.97±1.86)%;超声辐照强度0.5 W/cm2,时间10s、30s、60s时,细胞存活率分别为(84.75±0.75)%、(81.19±2.00)%、(69.56±0.32)%。其增殖抑制作用有明显的时间效应和剂量效应关系。2.将初筛出的超声条件介导转染,其中超声辐照时间30 s,强度0.5 W/cm2处理组的Hela细胞表达较多绿色荧光,转染率7.1%,而其余组的荧光表达相对较少,差异有统计学意义。结论:超声微泡对宫颈癌Hela细胞有增殖抑制作用;超声辐照时间30s,强度0.5 W/cm2时,超声微泡可最大限度促进P53质粒转染宫颈癌Hela细胞。第二部分超声微泡介导P53质粒对宫颈癌Hela细胞株转染效率的研究目的:探讨优化的超声微泡介导P53转染Hela细胞的转染效率。方法:以第一部分的实验结果,即超声强度0.5W/cm2,连续辐照时间30s进行体外培养宫颈癌Hela细胞的P53质粒转染,实验分为5组,即空白对照组、质粒组、质粒+微泡组、质粒+超声组、质粒+微泡+超声组,用RT-PCR分析各组转染情况。结果:RT-PCR显示质粒+微泡+超声组可见较亮的电泳条带,超声+质粒组有微弱的条带可见,前者的P53/β-actin光密度比值较后者大,差异有统计学意义,其余组未检测到目的基因的表达。结论:在优化的条件下,超声联合微泡可促进野生型P53质粒转染宫颈癌Hela细胞;单独超声辐照有较弱的促转染作用。