论文部分内容阅读
背景: 肿瘤生长是血管依赖性的，肿瘤通过分泌某种因子促进了内皮细胞的增殖和毛细血管的形成，而新生血管通过营养控制影响着肿瘤的生长。在缺乏新生血管的情况下，肿瘤将被限制于2-3mm大小的静止状态。不仅如此，肿瘤血管生成在肿瘤从良性向恶性的转变、癌细胞进入血液循环、转移灶的发展和破裂中都起着重要作用，涉及肿瘤从形成到转移的全过程。因此，抗肿瘤血管生成已成为抗肿瘤治疗新的研究热点。近年来研究发现某些传统的细胞毒化疗药物具有抗肿瘤血管生成的作用，成为血管抑制剂研究的新领域。
紫杉醇和5-氟尿嘧啶是临床上常用的化疗药物。紫杉醇通过促进微管聚合、抑制微管解聚，使肿瘤细胞阻滞于G2/M期。5-氟尿嘧啶能够干扰细胞核酸的正常代谢，抑制肿瘤细胞DNA的复制和转录。干扰素-α是重要的生物反应调节剂，既可以直接抑制肿瘤细胞的生长也可以增强机体对肿瘤的免疫能力，近年来还证明具有抗血管生成活性，但化疗药物与干扰素-α联合应用是否具有协同抗血管作用国内外尚无报告。
【目的】本实验旨在国内外现有的研究基础上探讨①紫杉醇、5-氟尿嘧啶的抗血管生成作用；②IFN-α与紫杉醇、5-氟尿嘧啶联合应用对血管内皮细胞增殖及鸡胚尿囊膜血管网生长的影响。
【方法】采用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)原代培养和鸡胚尿囊膜血管模型(CAM)，用MTT和记数法观察不同浓度的紫杉醇、5-氟尿嘧啶和干扰素-α对HUVEC的增殖抑制活性以及对CAM血管网形成的影响。
【结果】1.5-氟尿嘧啶在0.25ug/ml浓度以下时对内皮细胞存活率无明显影响，在0.25ug/ml浓度以上时，内皮细胞存活率明显下降并呈剂量依赖性；在选定浓度下(0.025～2.5ug/ml)，5-氟尿嘧啶对人肝癌7721细胞株的细胞存活率无影响。
2.紫杉醇在3.5nmol/ml浓度以下时对内皮细胞存活率无明显影响，在3.5nmol/ml浓度以上时，内皮细胞存活率明显下降并呈剂量依赖性；在选定浓度下(1～14nmol/ml)，紫杉醇对人肝癌7721细胞株的细胞存活率无影响。3.干扰素-α在1000u/ml浓度以下时对内皮细胞存活率无明显影响，在1000u/ml浓度以上时，内皮细胞存活率明显下降并呈剂量依赖性。
4.200u/ml的干扰素-α与3.5nmol/ml的紫杉醇联用时内皮细胞的存活率下降，且下降幅度较单用3.5nmol/ml的紫杉醇组明显。
5.5-氟尿嘧啶在0.25ug/ml浓度以下时对鸡胚尿囊膜血管形成无明显影响，在0.25ug/ml浓度以上时对鸡胚尿囊膜血管形成具有抑制作用。
6.紫杉醇在3.5nmol/ml浓度以下时对鸡胚尿囊膜血管形成无明显影响，在3.5nmol/ml浓度以上时对鸡胚尿囊膜血管形成具有抑制作用。
7.干扰素-α在1000u/ml浓度以下时对鸡胚尿囊膜血管形成无明显影响，在1000u/ml浓度以上时对鸡胚尿囊膜血管形成具有抑制作用。
【结论】紫杉醇和5-氟尿嘧啶在对肿瘤细胞无抑制活性的低浓度下即可明显抑制人脐静脉内皮细胞的增殖以及鸡胚尿囊膜血管网的形成，提示其在体内外均具有抗血管形成活性；干扰素-α与紫杉醇联合应用在体外具有抗血管形成的协同效应。