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干扰素家族(IFNs)具有生物功能多样性,已被广泛应用于病毒感染疾病的预防和治疗。干扰素诱导跨膜蛋白(IFITM)具有免疫细胞信号转导,细胞粘附、肿瘤发生、生殖细胞归位和成熟、及促进骨矿物化的生物学功能。人类IFITMs中仅表达IFITM1、IFITM2、 IFITM3和IFITM5四种,4种基因均位于11号染色体上,彼此毗连。自从cell上首次刊登关于干扰素诱导跨膜蛋白介导细胞抵御A型流感H1N1病毒、西尼罗河病毒和登革热病毒的研究以来,人们积极开展IFITM蛋白家族抗病毒作用研究。流感常常导致呼吸系统疾病的大流行。流感病毒NS蛋白是非结构蛋白,由病毒基因组的第八区段编码的NS1、NS2组成。流感病毒NS1作为干扰素(IFN)的拮抗剂,抑制IFN介导的抗病毒效应,NS2与基质蛋白M1、核蛋白NP共同作用,参与跨核膜转运。近年来,虽有研究揭示IFITM蛋白质抑制虫媒病毒的早期复制,但流感病毒NS蛋白与IFITMs蛋白分子的关系尚未见文献报道。实时荧光定量PCR技术用来检测基因表达水平,可自动分析检测数据,并在较短的时间内精确定量外源基因的表达水平。为了理清流感病毒NS蛋白表达对IFITMs蛋白表达的影响,本试验通过设置合适的(β-actin内参基因将目的基因表达归一化,调整荧光定量PCR条件,进行蛋白基因扩增稳定性、灵敏性、特异性等分析,建立了准确测定内参基因和目的基因在细胞中表达水平的体系方法,分析了流感病毒NS蛋白对人IFITM1、2、3基因表达水平的影响,同时利用Western-blot检测了IFITM1、2、3的蛋白表达量。实验结果表明：IFITM1、2、3和β-actin标准曲线的相关系数分别为0.998、0.99、0.99、0.995,标准曲线线性相关度很高,能够准确定量目的基因；扩增效率分别为106.284%、101.03%、104.929%、101.962%,批内及批间变异系数<1.58%,扩增效率很高并且变异系数很低,说明标准品具有良好的稳定性；灵敏度分别为2.52×100opies、1.3×100copies、3.7×101copies,显示该方法具有较强灵敏性。用IFITM1、2、3引物扩增鸡肝脏cDNA、禽流感H3N2cDNA,均没有出现特异性扩增,则说明扩增引物具有良好特异性。使用已建立的方法证明了流感病毒NS蛋白抑伟IFITM1、2、3基因水平上的表达,但在蛋白水平上却只抑制IFITM2、3的表达；在干扰素诱导研究中,即使存在干扰素,NS蛋白对IFITM1、2、3基因和蛋白表达水平也均有抑制作用；存在干扰素条件下,无NS蛋白时,IFITM1、2、3基因和蛋白表达水平均升高。本研究结果证明了IFITMs与NS蛋白的相互作用仍有人们未知的复杂网络,有待进一步深入研究。