【摘 要】
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RIG-G(retinoid acid induced gene-G)基因是利用全反式维甲酸(ATRA)的诱导,采用差异显示PCR方法从急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞系NB4中克隆到的一个新基因.为了了解RIG-G
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RIG-G(retinoid acid induced gene-G)基因是利用全反式维甲酸(ATRA)的诱导,采用差异显示PCR方法从急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞系NB4中克隆到的一个新基因.为了了解RIG-G基因及其所编码的蛋白质的生物学功能,进一步深入研究RIG-G基因在维甲酸信号转导途径中的作用,采用酵母双杂交的方法筛查到了能与RIG-G发生相互作用的JAB1.由于在酵母这种低等真核细胞中缺少诸如高等真核细胞中各种保证蛋白正常生物学功能发挥所必需的翻译后修饰,因此这种方法筛到的阳性克隆并不一定代表了真实的作用.我们采用了co-IP(co-immunoprecipitation)实验,对这种相互作用进行了进一步的真核水平验证.同时利用pGEX-5X2系统原核表达了RIG-G蛋白,并用之免疫兔子获得了兔抗血清,用该兔抗血清检测ATRA诱导后的NB4细胞系时,RIG-G蛋白诱导表达的时相与以前工作中的Northern结果一致,缺失型的RIG-G的荧光素酶报告系统检测也基本说明了这种互作的存在.这些实验初步结果及抗体的获得为理解和进一步深入研究RIG-G在ATRA诱导NB4分化中的作用机制提供了线索.
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