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病毒性脑炎是威胁人类生命健康的一类重要疾病,其中流行性乙型脑炎又称为日本脑炎（Japanese encephalitis,JE）,是由嗜神经性乙型脑炎病毒（简称乙脑病毒）,国际上称日本脑炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）引起的脑实质性炎症为主的急性中枢神经系统传染病。全球每年约有6.7万例JE患者,其病死率可高达约25%～30%,幸存者中约有30%～50%患者出现严重的神经、精神系统后遗症。迄今,对于乙脑尚无特异有效的治疗方法。近年来由于JEV疫苗的广泛使用,极大地降低了乙脑的发病率,但是在一些地区还会时常出现局部暴发流行,JEV感染仍然是亚洲多个国家的重要公共卫生问题之一。研究表明,机体被携带JEV的蚊虫叮咬后,病毒首先在局部皮肤和淋巴结中复制,然后经过两次病毒血症,在一部分人群中JEV可突破血脑屏障（Blood brain barrier,BBB）进入中枢神经系统（Central nervous system,CNS）,引起神经元的感染与破坏、小胶质细胞活化等,最终导致脑炎发生。目前,在JEV致脑炎过程中哪些分子参与BBB维持与破坏,神经元、胶质细胞中抗病毒相关分子、致病因子的种类及机制等尚不清楚。TAM受体是新近发现的一个受体酪氨酸激酶亚家族,包括Tyro3、MerTK和Axl,在固有免疫系统的调控及凋亡细胞的吞噬方面发挥着重要作用。最近一些研究显示,MerTK参与病原体入胞、炎症反应调控,特别是在与JEV同属黄病毒属的西尼罗病毒（WNV）感染后保持BBB完整性从而减少脑内炎症中发挥重要作用。目前关于MerTK分子在JEV感染致脑炎过程中的作用尚未见报道。为此,我们进行了如下研究:目的:1.研究JEV致脑炎过程中MerTK分子在外周组织对病毒复制的影响和炎症反应的调控作用。2.研究JEV致脑炎过程中MerTK分子在脑组织对病毒复制的影响和炎症反应的调控作用。方法:1.构建小鼠模型,以MerTK基因敲除小鼠和野生型小鼠为对象,通过足底注射（106PFU）明确JEV感染后小鼠存活率以及行为学变化。2.构建足底注射小鼠模型,通过qPCR、Wb以及空斑实验明确两组小鼠感染JEV后外周组织的病毒载量及炎性反应。3.构建MerTK基因敲低的巨噬细胞和MerTK敲除原代巨噬细胞,通过qPCR明确JEV感染后巨噬细胞中病毒复制和炎症反应。4.构建足底及脑内注射小鼠模型,通过qPCR、Wb、空斑实验以及HE染色明确两组小鼠感染JEV后脑组织的病毒载量及炎性反应。5.构建体内外BBB模型,通过荧光素钠法定量、Wb、组织免疫荧光、qPCR以及电阻抗检测明确JEV感染后体内外BBB通透性的变化。6.构建MerTK基因敲低的神经元细胞、星形胶质细胞以及小胶质细胞细胞系,通过qPCR、Wb、空斑试验明确低表达MerTK的神经细胞在JEV感染后病毒复制变化。结果:1.MerTK-/-小鼠JEV感染后发病率和死亡率明显增加,脑炎症状更加明显;与WT小鼠组相比,MerTK-/-小鼠感染JEV后外周组织（血液、脾脏）中病毒复制和炎症因子无明显差异;敲除/敲低MerTK能够抑制巨噬细胞中病毒的复制及炎症反应。2.与正常小鼠相比,MerTK-/-小鼠脑组织中病毒载量较高,炎症反应增加不明显;在体内、外BBB模型中,MerTK基因敲除/敲低组在JEV感染后BBB通透性明显增加,内皮细胞紧密连接分子表达量降低;神经元细胞、星型胶质细胞、小胶质细胞中低表达MerTK后促进了JEV的复制。结论:1.MerTK在JEV感染致脑炎的过程是一种保护性因子;2.MerTK分子缺失对外周组织中JEV复制、炎症反应的影响较小;3.MerTK分子通过参与BBB完整性的维持,调控JEV在神经元细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞中的复制,从而缓解JEV引起的病毒性脑炎。而其在炎症反应调控方面不明显。