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本试验根据Genbank上已发表的类胰岛素生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因序列(D83272)设计并合成了特异性引物，取新鲜鲤鱼肝脏并提取其总RNA为模板，用RT-PCR方法扩增出528bp的目的片段，将其克隆到pMD18-T载体上，经酶切鉴定和序列测定证明该序列是鲤鱼IGF-Ⅰ。鲤鱼IGF-Ⅰ开放阅读框由486个核苷酸组成，推测其编码产物由162个氨基酸组成。经核酸序列分析比对后发现，鲤鱼IGF-Ⅰ与Genbank已发表的鲤鱼IGF-Ⅰ序列的同源性较高，为94.4％-99.0％，氨基酸的同源性为94.0-97.3％，对IGF-Ⅰ基因氨基酸的亲水性、蛋白表面可能性和表面抗原性进行分析，表明与IGF-Ⅰ基因编码的氨基酸性质一致。将克隆的鲤鱼IGF-Ⅰ的成熟肽基因另行添加启动子和终止子后亚克隆到原核表达载体pBV220上，构建重组表达载体pBV220-IGF-Ⅰ。将酶切鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，通过温度诱导表达重组IGF-Ⅰ蛋白。SDS-PAGE分析表明，在相对分子质量约为7kD(非融合蛋白)处有明显的蛋白质表达条带，在6h表达产物最高，表达的非融合蛋白约占菌体总蛋白的15.0％左右，而未经诱导的pBV220-IGF-Ⅰ在7 kD处无条带产生。洗涤表达的IGF-Ⅰ包涵体并用MTT法检测其生物学活性，通过t检验分析表明所获得的重组鲤鱼IGF-Ⅰ具有较高的促同科的草鱼肾细胞增殖反应活性，具有较强的生物学活性。本实验属国内首次克隆出鲤鱼IGF-Ⅰ基因，并原核表达出鲤鱼IGF-Ⅰ蛋白，为进一步研究鲤鱼IGF-Ⅰ在体内外的作用及将其作为鲤鱼的生长促进剂应用于临床提供了物质基础；同时对鲤鱼IGF-Ⅰ的深入研究，为类胰岛素生长因子在机体内的分子调控、信号传导及其在胚胎发育、生殖和免疫中的作用机理等作了一定铺垫。