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目的:
研究锆基金属玻璃遗传毒性和溶血毒性,探讨锆基金属玻璃作为牙科种植体的可行性
方法:
1、溶血试验分组:实验组为锆基金属玻璃,对照材料为TI64和全瓷氧化锆。阴性对照组为生理盐水,阳性对照为蒸馏水。当材料和血液接触时,其溶血成分的存在可导致红细胞的破坏,血红蛋白的释放,从而使游离血浆血红蛋白增加,产生对机体的毒副作用。任何物质在光谱分析中均有其特定的吸收光谱,可用分光光度计进行检测,并可进行定性或定量分析。
2、溶血试验采用兔血,采用心脏采血取兔血的方法。检测试验材料在生理盐水中孵育90分钟,在最后60分钟有兔血存在时材料的溶血性能。
3、溶血性能的检测即根据其血红蛋白的释放量,采用分光光度计比色法对比三种材料的溶血率。
4、通过材料与血液直接接触可检测材料的可溶性或释放性成分的溶血性能及材料表面的溶血性能。
5、Ames试验利用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验原理对锆基金属玻璃的致突变性进行检测。本试验体系中共包含5种菌株:TA97a,TA98,TA100,TA102和TA1535。采用平板渗入法,分别在代谢活化(S9+)和非代谢活化(S9-)两种处理条件下进行。本试验选择模拟体液(SBF)为溶剂,共设5个剂量组:8倍原液/皿、4倍原液/皿,2倍原液/皿、1倍原液/皿、1/2倍原液/皿。同时所有菌株在两种处理条件下均平行设溶剂对照和阳性对照:溶剂对照均使用SBF(100ul/皿);代谢活化条件下,菌株TA97a,TA98,TA100和TA1535的阳性对照均使用2-氨基芴(2-AF,20ug/皿),TA102的阳性对照使用1,8-二羟基蒽醌(50ug/皿);非代谢活化条件下,菌株TA97a,TA98和TA102阳性对照使用敌克松(Dexon,50ug/皿),TA100和TA1535的阳性对照使用叠氮钠(NaN3,1.5ug/皿)。各组均设3个平行皿。
结果:
1.Ames试验结果:在非代谢活化和代谢活化处理条件下,培养开始前和培养结束后,观察底层培养基表面,各剂量组均未观察到供试品沉淀。在细菌毒性方面,各菌株的各剂量组均未发现细菌毒性。此外,各菌株的各剂量组回变菌落数均低于溶剂对照组的2倍,同时各对照组回变菌落数均在正常值范围内,背景菌落密度和生长状态正常。说明本试验体系及代谢活化系统有效。
2.溶血试验结果:锆基金属玻璃的溶血率最低,三种材料的溶血率均远低于5%。并且每组试验的三个试样之间的溶血率偏差均小于20%;,阴性对照的吸光度值不大于0.03,阳性对照的吸光度值为0.5-1.1之间。
结论:
1、Ames试验:本试验中所有菌株在非代谢活化和代谢活化处理条件下的细菌回复突变试验结果均为阴性,此结果表明,锆基金属玻璃在本试验条件下无致突变性。
2、溶血试验:锆基金属玻璃没有溶血作用,不会造成红细胞的损害。