【摘 要】
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低分子量尿激酶[prourokinase(144-411),pro-UK(144-411)]是尿激酶原(prourokinase,pro-UK)的一种衍生物,由pro-UK的144-411位氨基酸残基组成,与pro-UK具有相似的溶栓性质.膜
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低分子量尿激酶[prourokinase(144-411),pro-UK(144-411)]是尿激酶原(prourokinase,pro-UK)的一种衍生物,由pro-UK的144-411位氨基酸残基组成,与pro-UK具有相似的溶栓性质.膜联蛋白(Annexin V)是从人胎盘及脐动脉内皮细胞提取的一种分子量为36kD的钙结合蛋白,具有很好的抗栓作用,用于血栓治疗有一定的发展前景.为了获得具有靶向性的抗凝和溶栓双功能分子,利用基因工程方法,对低分子量尿激酶和Annexin V进行融合表达.为了使低分子量尿激酶和Annexin V在融合蛋白中保持正确的构象,用抗凝物质水蛭素的功能片段——水蛭素12肽作为连接片段,N端是低分子量尿激酶,C端是Annexin V,并在家蚕杆状病毒载体表达系统中进行了表达.用APTT法测定表达产物的抗凝活性,家蚕细胞中的表达产物使APTT时间延长了40秒,幼虫表达产物使APTT时间延长了15秒,比野生病毒Bm-PAK6感染表达产物的APTT时间延长了一倍以上,表现出明显的抗凝活性.体外实验表明家蚕培养细胞和幼虫表达的重组低分子量尿激酶与Annexin V融合蛋白具有溶栓与抗凝双功能.
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