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褪黑激素(melatonin, MEL)是一种生物体内强有效的天然抗氧化剂,不仅自身可以清除自由基,而且还可以增强体内抗氧化酶的作用,减轻活性氧对机体的损害。目前对于MEL抗氧化功能的研究多集中于哺乳动物的卵母细胞,而对于同样在卵泡发育过程中起着重要作用的颗粒细胞研究较少,尤其在鸟类上这方面相关的报道还未曾见到。本研究以天府肉鹅母系母鹅为试验材料,研究了鹅卵泡卵黄内MEL的含量和不同等级卵泡颗粒层细胞中抗氧化酶(SOD1、GPx1、CAT)的表达量,探讨MEL在卵泡发育过程中的抗氧化作用。同时以鹅的颗粒细胞为模型,初步探讨了MEL在鹅颗粒细胞中的抗氧化作用,再用H2O2模拟氧化应激对颗粒细胞造成损伤,最后对H202诱导的颗粒细胞进行MEL预处理,进一步研究MEL可以缓解H2O2对颗粒细胞造成的凋亡,从而验证MEL在鹅颗粒细胞中的抗氧化作用。主要研究结果如下：(1)测了鹅等级卵泡卵黄中MEL的含量,发现随着卵泡的发育成熟,MEL的含量呈现递增的趋势,在F1卵泡内达到最大值8.865 pg/ml,等级卵泡内的MEL均高于血浆(5.811 pg/ml),表明MEL在卵泡的发育过程中起着重要作用。(2)检测了鹅等级卵泡颗粒细胞中抗氧化酶SOD1、GPx1、CAT的基因表达量,发现三种酶的表达并不呈明显的发育性趋势,SOD1、GPx1在F2内表达较高(P<0.05),分别达到23.5倍和10.4倍。而CAT在4-6mm.8-10mm、F4内表达较高(P<0.05)。(3)以鹅颗粒细胞为模型,用不同浓度(0、0.1、1、10ng/ml)外源MEL作用于颗粒细胞,发现MEL可以提高细胞的活性(P<0.05),减少细胞内ROS含量,促进MEL受体(P<0.05),抗氧化酶SOD1、GPx1、CAT(P<0.05)和抗凋亡基因BCL-2的表达(P>0.05),抑制促凋亡基因CASPASE3的表达(P<0.05),初步说明MEL对颗粒细胞起着抗氧化作用,抑制细胞凋亡。(4)用不同浓度(0、10、100、1000 umol/L) H2O2模拟氧化应激作用于颗粒细胞,发现H2O2 (1000 umol/L)显著降低了颗粒细胞的活性(P<0.05),抑制SOD1的基因(P<0.05)和蛋白表达(P>0.05),促进GPx、CAT、MEL受体的基因和蛋白表达(P<0.05),抑制BCL-2而促进CASPASE3的基因表达(P<0.05),表明H202能够促进颗粒细胞的凋亡。(5)用H2O2和MEL共同作用于颗粒细胞,发现MEL能够减少由H2O2引起的ROS含量上升和细胞的凋亡,降低由H2O2诱导的CAT、MEL1C、CASPASE3的基因表达量上调(P<0.05),升高由H2O2诱导的BCL-2基因表达量下调(P<0.05)。这些结果进一步表明MEL能够缓解氧化应激对颗粒细胞的损伤,在鹅颗粒细胞的生长过程中发挥了重要的抗氧化作用。