聚乙二醇改性壳聚糖固定化L-天门冬酰胺酶的研究

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该文研制了新型聚乙二醇改性壳聚糖(PEG-CS)载体,首次用该载体固定L-天门冬酰胺酶,考察了固定化条件对固定化酶活力的影响及固定化酶的性能.研究了固定化酶在缓冲液中清除天门冬酰胺的反应性能;首次研究了该固定化酶从血浆中清除天门冬酰胺的反应性能;建立了固定化酶间歇反应的宏观动力学模型.获得以下主要结论:1、用交联法可制备亲水性和耐酸性良好的聚乙二醇改性壳聚糖载体,具有较大的通量.2、在合适的固定化条件下,固定化酶的活力可达20~40IU/g;米氏常数Km值为6.49×10<-4>M,较适温度约37℃左右,具有良好的耐胃蛋白酶水解性能、保存性能和较好的操作稳定性.3、在适当的条件下,固定化酶间歇反应能够完全清除缓冲液中的L-天门冬酰胺;同时,固定化酶具有良好的连续分解天门冬酰胺性能.4、在适当的条件下,固定化酶间歇反应可完全清除血浆中的天门冬酰胺.同时,血浆在固定化酶柱中具有较大的通量,固定化酶具有良好的连续清除血浆天门冬酰胺性能.5、固定化酶间歇宏观反应动力学模型能够很好地描述固定化酶间歇清除缓冲液中L-天门冬酰胺反应过程,计算值与实验值吻合良好.同时,该模型可用于描述固定化酶间歇清除血浆中L-天门冬酰胺的反应过程,模型参数合理.该文研究为进一步开展固定化酶清除血液中天门冬酰胺过程奠定了良好的基础.
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