【摘 要】
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巨核细胞的发育和后继的血小板生成受到多种生长因子和细胞因子的调节。血小板生成素(TPO)不仅支持早期造血干细胞的存活和增殖,而且促进各个阶段巨核细胞的增殖、分化和成熟,
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巨核细胞的发育和后继的血小板生成受到多种生长因子和细胞因子的调节。血小板生成素(TPO)不仅支持早期造血干细胞的存活和增殖,而且促进各个阶段巨核细胞的增殖、分化和成熟,是血小板生成的重要刺激因子。重组人TPO作为升血小板药物的临床试验已进行到Ⅱ期,虽然它能较快促进血小板生成,但因一些病人有明显的血栓倾向而受到限制。因此研制临床适用的升血小板药物需要拓展新途径,尤其是发现与TPO功能相似的未知细胞因子。从人尿中分离纯化到一种生物活性与TPO类似的蛋白(L-TPO),其生物活性和免疫原型和TPO不同。尤其L-TPO的N端15个氨基酸序列经BLASTp搜索与所有已知促血小板生成的蛋白均无同源性:在体外单独使用L-TPO,可使脐血干/祖细胞得到明显的扩增,因此初步判定它可能是一种新的促血小板生成因子。根据L-TPON端已知的15个氨基酸序列设计简并或最佳猜测体引物,从自制的人胎肝总RNA中经RT-PCR,或从CLONTECH的Marathon-ReadyTMcDNA库中经Nested-PCR得到几种cDNA片段,将其克隆到T-载体后测序鉴定并对之进行初步的生物信息学分析。
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