草酸青霉果胶酶提取液诱导植物抗病性研究

来源 :中国科学院生态环境研究中心 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fujinfa
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本文以草酸青霉BZH-2002固态发酵产物-果胶酶提取液为诱导因子,对其诱导黄瓜、烟草抗病性情况进行了研究.草酸青霉菌BZH-2002是一株从土壤中分离得到的、具有高产果胶酶特性的菌种,它能够利用甜菜废渣作为唯一碳源,通过单因素实验和产酶条件研究,确定了果胶酶合成的最佳培养基配方及发酵条件.同时,对果胶酶提取液中内切果胶酶的酶学性质进行了测定.以草酸青霉BZH-2002固态发酵产物-果胶酶提取液(简称果胶酶)作为诱导激发子,喷雾处理黄瓜、烟草幼苗,能够诱导黄瓜对黑星病的抗性以及诱导烟草对烟草花叶病毒病的抗性.而且果胶酶的诱导抗病效果受诱导浓度、寄主植物品种、诱导处理与接种间隔期、诱导方法以及病原菌挑战接种压力等条件影响.果胶酶在黄瓜植株上表现为局部诱导抗性,而在烟草植株上既表现为局部诱导抗性又表现为系统诱导抗性.植物诱导抗性的产生一般都伴随着植物体内一些抗病相关物质的诱导合成.以黄瓜植株为试材,经果胶酶喷雾处理后,黄瓜叶片中过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、β-1,3-葡聚糖酶、木质素含量、富含羟脯氨酸糖蛋白(HRGP)含量均被诱导产生;超氧化物歧化酶(SOD)、几丁质酶以及可溶性酚类物质含量没有被诱导产生.以烟草植株为试材,经果胶酶喷雾处理后,烟草叶片中POD、PPO、PAL、SOD、几丁质酶以及β-1,3-葡聚糖酶活性均明显升高.在果胶酶诱导处理后接种病原菌的黄瓜和烟草植株中,上述防御酶或抗病相关物质均比未经诱导处理直接接种病菌的对照植株要高.由此表明,果胶酶诱导黄瓜和烟草抗病作用,是通过诱导植物体内多种防御相关物质来实现的.为了确定草酸青霉BZH-2002果胶酶提取液中内切果胶酶在诱导抗病中的作用,本论文对果胶酶提取液中的内切果胶酶成分进行了分离提纯,提纯过程包括:超滤、亲和层析、CM-阳离子交换层析、快流速阴离子交换层析、Sephadex G-100凝胶层析,并最终在果胶酶提取液中分离得到三种具有诱导抗病活性的内切果胶酶,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,三种内切果胶酶分子量大小相同,均为41 kD,但它们的诱导抗病活性有一定差别,其中第二种内切果胶酶的诱导抗病效果最好,诱导效果达33.43﹪.除上述三种内切果胶酶具有诱导抗病作用外,在分离提纯过程中,发现果胶酶提取液中还有其它非内切果胶酶物质在诱导抗病中也发挥一定作用.这些诱导抗病活性物质对热的稳定性表现不同.
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