奶牛精液冷冻稀释液的研究

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本研究通过对奶牛精液冷冻稀释液组成成分的改变,借助精子图像分析仪测定精子活力、速度,通过考马斯亮蓝染色测定精子畸形率和顶体完整率,力图提高奶牛精液冷冻保存的效果,结果如下: 1.不同生物缓冲液对冷冻解冻后精子的影响:柠檬酸三钠溶液(CITRATE),柠檬酸溶液(TCA),Hepes溶液这三种生物缓冲液在保护冷冻精子的活力、速度、复苏率、精子畸形率和顶体完整率上无显著差异(P>0.05)。Hepes溶液处理的效果比其他缓冲液的处理效果好,但在显微镜下观察时,可分辨度明显较差。 2.不同SDS浓度对精液冷冻解冻后精子的影响:当SDS的添加浓度为0.1%和0.15%时,精液解冻后精子活力显著高于对照组(P<0.05)。其中SDS的浓度为0.15%时精子活力最高。当SDS的添加浓度为0.15%时,精液解冻后精子复苏率和顶体完整率都比对照组有显著提高(P<0.05)。SDS的添加浓度为0.2%时,精子活力、复苏率和顶体完整率都有所下降,畸形率有所提高。 3.冷冻液的不同保存时间对精液冷冻解冻后精子的影响:延长含有SDS的冷冻稀释液的保存时间可以提高冷冻复苏后的精子的活力、运动速度、精子复苏率和顶体完整率,降低精子畸形率。用在5℃的冰箱中保存12h、24h和48h的冷冻稀释液处理精液,解冻后精子活力显著高于对照组(0h)(P<0.05)。其中保存24h的冷冻稀释液保存冷冻精液的效果最好。 4.添加不同的糖对冷冻解冻后精子的影响:在冷冻稀释液中分别添加果糖、葡萄糖、海藻糖,对冷冻解冻后精子活力、复苏率,畸形率、顶体完整率、直线运动速度(VSL)和曲线运动速度(VCL)均无显著影响(P
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