抗致病性弧菌及希瓦氏菌有效中药与方剂的筛选、抗菌机理研究

来源 :广东海洋大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:bigxiong
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为探讨中药方剂水煎液对致病性弧菌及希瓦氏菌的抗菌活性、抗菌机理,为其在水产养殖中的推广应用提供研究基础。本研究采用平皿打孔法测定17种中药对副溶血性弧菌2株、哈氏弧菌1株、创伤弧菌1株、腐败希瓦氏菌1株、鲍鱼希瓦氏菌1株、海藻希瓦氏菌2株共8株菌的体外抑菌效果;采用平皿打孔法和试管两倍稀释法测定11种中药的相互作用关系及三个方剂的体外抑菌效果;选用0.35g左右的健康方斑东风螺100个,随机分为5组,每组20个,第Ⅰ组为对照组,不添加方剂1,Ⅱ~Ⅴ为试验组,分别添加一定量的方剂1,使方剂1在水体中的浓度达到1/160g/mL、1/320g/mL、1/640g/mL、1/1280g/mL,分别在给药前及给药1,3,5,7d共取样5次,测定水中和方斑东风螺内脏团内菌落总数和菌群构成;通过测定方剂1作用一定时间后副溶血性弧菌、哈氏弧菌、创伤弧菌和鲍鱼希瓦氏菌胞外碱性磷酸酶含量和电导率的变化探讨中药方剂的作用机理。结果显示:1.17种中草药的水煎液对8株菌的抑制作用不同,其中五倍子、乌梅、苏木、猴耳环效果最好,抑菌圈直径介于14.44mm~29.00mm;石韦、鸭胆子、益智仁、郁金、板蓝根、贯众除石韦对一株海藻希瓦氏菌有抑菌作用外其余均未见抑菌作用。2.11种中草药的联合药敏试验中除对药黄芩和乌梅、桉叶和五倍子、秦皮与地榆、乌梅与地榆、苏木与大黄、苏木与石榴皮、桉叶与黄芩、大黄与黄芩、五倍子与秦皮对供试的8株菌中某些供试菌表现为协同外,其余对药对供试的8株菌相互作用都表现为相加。3.三个方剂对副溶血性弧菌、哈氏弧菌、创伤弧菌和鲍鱼希瓦氏菌抑菌圈直径介于12.32mm~18.54mm,方剂1的抑菌效果最好,最小抑菌浓度介于1/640~1/160g/mL,最小杀菌浓度介于1/320~1/160g/mL。4.水中添加不同剂量的方剂1,对水中菌落总数和菌群构成有一定的作用,其中添加剂量组为1/320g/mL对水中菌落总数和菌群构成的影响较大,水中菌落总数减少2.80×106个/mL,且弧菌数量减少40%。5.水中添加不同剂量的方剂1,对生活在水中方斑东风螺内脏团内菌落总数和菌群构成有一定作用,其中添加剂量组为1/640g/mL对方斑东风螺内脏团内菌落总数和菌群构成的影响较大,方斑东风螺内脏团内菌落总数减少2.85×106个/mL,且弧菌数量减少50%。6.浓度分别为1/320g/mL,1/640g/mL,1/640g/mL和1/160g/mL的方剂1对副溶血性弧菌、哈氏弧菌、创伤弧菌和鲍鱼希瓦氏菌作用一段时间后,相应菌液的胞外碱性磷酸酶含量随处理时间的延长升高,而对照组变化很小。7.浓度分别为1/320g/mL,1/640g/mL,1/640g/mL和1/160g/mL的方剂1对副溶血性弧菌、哈氏弧菌、创伤弧菌和鲍鱼希瓦氏菌作用一段时间后,相应菌液电导率增加,而对照组变化很小。可见,17种中草药对8株菌的抑菌作用能力不一样,五倍子、乌梅、苏木、猴耳环优于其他中草药;11种中草药组成的对药其相互作用关系大部分是相加,少数为协同;三个方剂中方剂1的抑菌效果最好,方剂3次之,方剂2最弱;水中添加不同剂量的方剂1,对菌落总数和菌群构成有一定的作用,其中浓度为1/320g/mL、1/640g/mL的剂量组分别水和方斑东风螺内脏团内菌落总数和菌群构成的影响最大;方剂1的抗菌作用机理是破坏细菌细胞壁和细胞膜的完整性,导致细胞膜通透性增加。
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