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细菌的耐药性已是当今世界一个普遍存在的问题。对抗生素存在耐药性的病原体广泛出现在医院和社区中,由于细菌产生耐药性的原因很多,导致具有多重耐药性生物的出现和迅速传播。耐药菌因产生之快、传播之迅速、耐药率之高而引起世界性关注。我国传统的中药以其独特的理论及功效在抵制耐药性产生方面显示出极强的生命力。中药成分复杂,细菌不易产生耐药性,并且许多中药都有极好的抑菌活性。为了探讨中药中活性成分的耐药性规律,本文选了四种中草药,并从中提取出其主要的活性成分,然后应用微量量热法研究了大肠杆菌对这四种中药中活性成分的耐药性。主要研究内容如下:1.引言部分,系统介绍了耐药性、中药的概况;概述了微量量热法的发展及对细菌的研究现状;介绍了微生物生长模型;阐述了本文的主要研究内容和研究意义。2.中草药成分的提取及其表征根据不同中药成份的性质,采用不同的实验方法对中药(穿心莲、麻黄、夏枯草、绵马贯众)的活性成份进行提取,得到四种单体(穿心莲内酯、麻黄碱、熊果酸、绵马贯众素ABBA),并通过单晶衍射仪、高效液相色谱、红外光谱仪等对单体进行了表征。3.中药成分对大肠杆菌生长代谢抑制规律的研究为了确定药物对大肠杆菌生长代谢作用的规律和最佳用药浓度,分别测定了在不同浓度药液作用下大肠杆菌生长代谢的热功率—时间曲线,用Logistic方程对其指数生长期的曲线进行处理,得到细菌在不同浓度药液中的生长速率常数,进而拟合出生长速率常数与药物浓度的关系,确定了最小抑菌浓度。结果表明,这四种单体对大肠杆菌均有较好的抑制作用。4.大肠杆菌对中草药耐药性规律的研究在药物亚抑菌浓度下传代培养细菌(传代培养的细菌称为传代菌),然后测出在该药物浓度作用下的传代菌的热功率—时间曲线,用logistic方程处理指数生长期曲线,得出细菌的生长速率常数,进而拟合出生长速率常数与传接细菌次数之间的关系。初步得出了其耐药性的规律。结果显示,大肠杆菌在四种单体药液中均能产生耐药菌,且其耐药性随着传接次数的增加而增强。5.大肠杆菌对中药活性成分耐药性减小规律的研究将培养的耐药菌放在空白培养液中传接,然后测出在相同药物浓度作用下的传代菌的热功率—时间曲线,用logistic方程处理指数生长期曲线,得出细菌的生长速率常数,进而拟合出生长速率常数与传接细菌次数之间的关系。得出了其耐药性减小的规律。结果显示,随着传接次数的增加,耐药菌在四种单体的药液中的耐药性减弱甚至消失。本文创新之处:1.细菌对抗生素耐药性的研究很多,但对中药中单体的耐药性研究相对较少。本文从穿心莲、麻黄、夏枯草、绵马贯众中分离出单一组分,并通过单晶衍射仪、高效液相色谱红外光谱仪等对穿心莲内酯进行了结构表征。2.微量量热法作为研究耐药性的一种新手段,能够准确确定MIC,具有快速、准确定量、可靠、重复性好等优点。用微量量热法测定了大肠杆菌对中药成分的耐药性,并做了比较。得到了一些重要的参数,这些参数可以为临床治疗提供理论依据。