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帕金森病(PD)是一种常见的神经退行性疾病,在老年人中发病较多,其病理学特征是黑质多巴胺能神经元的变性死亡,从而导致纹状体多巴胺含量显著减少。帕金森病的临床表现主要包括运动能力下降、抖动性增强和僵硬等,同时患者可伴有情绪紊乱、睡眠障碍和认知障碍等非运动症状。虽然帕金森病患者在寿命上与他人无异,但是仍然给很多人的生活带来了很大的困扰。左旋多巴(L-3,4-二羟基苯丙氨酸,LD)是目前帕金森病治疗的主要药物,但是长期使用会导致大量副作用的产生,如左旋多巴诱发的运动障碍(LID)。所以在本研究中为了减少LD的用量及其副作用,我们进行了相关研究,具体如下:一方面我们通过微乳液结晶法制备了负载左旋多巴的结晶纳米颗粒(LD晶体)。LD晶体显示出正ζ电位,纳米级大小和更长的左旋多巴释放时间。此外,LD晶体对1-甲基-4-苯基-1、2、3、6-四氢吡啶(MPTP)诱导的PD小鼠模型显示出明显的改善作用。与纯LD治疗相比,LD晶体给药可增加黑质纹状体途径中酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元数量,对PD小鼠运动能力和探索行为具有更好的改善作用。该研究结果表明:作为一种新型的纳米粒子,LD晶体是用于药物控制和释放的有效潜在药物载体。另一方面,天然产物小白菊内酯(PTL)是药用植物小白菊(Tanacetum parthenium)的活性成分,具有抗氧化和抗炎的作用,根据其结构改造的含笑内脂(micheliolid,MCL)具有与PTL相当的活性,且稳定性更好,ACT001是二甲氨基富马酸盐形式的MCL(dimethylaminomicheliolid,DMAMCL),有利于提高口服生物利用度。我们将利用MPTP诱导的PD小鼠模型,联合LD,考察ACT001对PD小鼠的治疗效果。结果发现:ACT001可降低PD小鼠的运动功能障碍和黑质纹状体途径中多巴胺能神经元退变,抑制α-突触核蛋白的表达、星形胶质细胞活化和炎症因子白介素1β(IL-1β)的产生。同时,ACT001还增加了黑质和纹状体中抗凋亡因子Bcl-2的水平和p Akt/Akt比率,降低了促凋亡因子Bax及Caspase3的表达。此外,有研究表明NOD(nucleotide binding oligomerization domain)样受体家族3(NOD-like receptors)NLRP3炎症小体激活所导致的神经炎症与PD的发展相关。我们的研究结果表明,ACT001可以减少MPTP诱导的PD小鼠的运动障碍、情绪状态和认知缺陷。此外,它减轻了黑质纹状体途径中的多巴胺能神经元变性,并抑制了MPTP诱导的PD小鼠中脑的氧化应激、炎症反应和NLRP3炎症小体的激活,削弱了黑质纹状体途径中的小胶质细胞活化。总之,我们的研究表明,ACT001可以减轻MPTP诱导的PD小鼠中NLRP3介导的神经炎症。综上所述,纳米结晶载体可作为新型LD的药物载体,倍半萜内酯类化合物ACT001可联合LD,协同改善帕金森病的病症,该研究有望发展一种安全有效的PD给药方法和组合用药策略。