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目的 2型糖尿病血脂异常是一类常见的以脂蛋白数量与质量改变为特点或表现为脂蛋白代谢紊乱的并发症,其典型症状为:血清含有高水平甘油三酯、低水平高密度脂蛋白及大量小低密度脂蛋白颗粒。2型糖尿病脂代谢紊乱进一步发展会引发血脂在血管内堆积,影响血管,推动动脉粥样硬化发生与发展。现阶段针对2型糖尿病糖脂代谢紊乱的研究主要集中在Insulin和AMPK等信号传导途径在de novo lipogenesis以及VLDL、Chylomicron合成分泌中的作用,然而能量供应短缺引发细胞核仁应激也是2型糖尿病的核心病理之一,但相关研究并不多见。因此,本研究旨在探究由肝细胞核仁应激引发核仁蛋白PES-1下调对2型糖尿病糖脂代谢紊乱的影响。方法 动物实验:6周龄的KKA~y雄性小鼠与C57小鼠自由进食进水,保持20-26℃温度,相对湿度40%-70%,昼夜明暗交替12小时实验环境,适应性喂养一周后,KKA~y小鼠高脂饲料诱导三周以上,尾静脉采血检测血糖,连续三天内空腹血糖>11.1mmol/L即为模型成功。T2DM KKA~y小鼠随机分为实验组(PES-1组)和实验对照组(GFP组),C57小鼠为正常对照组。向PES-1组尾静脉注射腺病毒HBAAV2/9-Hspa9 sh RNA2-GFP,GFP组注射对照腺病毒HBAAV2/9-GFP,继续高脂饲养四周。其间每周测一次小鼠体重、空腹血糖和饮食量。28天后,禁食8h后剖杀(n=8/组),取血和肝脏组织检测血清与肝组织中TC、TG含量和PES-1蛋白表达水平。细胞实验:Mc A-RH7777大鼠肝癌上皮细胞精确计数传代入六孔板,每孔细胞数量均等,分为实验组(PES-1组)与对照组(NC组),每组3孔。24h后向实验组转染PES-1 si RNA,向对照组转染非特异NC si RNA,72h后检测细胞与培养基中脂质四项(TC、TG、HDL-C、LDL-C),利用Western Blotting检测细胞蛋白表达。结果 在糖代谢方面,与正常组相比,PES-1的下调导致了糖异生两个关键限速酶pepck和G6Pase的显著上升,促进糖异生,但没有影响其上游蛋白AKT和FOXO1的磷酸化水平。在体内恢复T2DM小鼠肝脏PES-1表达后,明显延缓了KKA~y小鼠血糖上升。在脂代谢方面,一方面,与正常组相比,PES-1下调使TG水平均异常升高,体内恢复PES-1表达可恢复TG至正常水平。相应的,在蛋白表达水平,与甘油三脂合成有关的SREBP1c与ACC活性升高。另一方面,PES-1的改变并没有影响TC、HDL-C、LDL-C的水平,在蛋白水平,PES-1的下调也不影响胆固醇合成蛋白HMGCS1的表达水平。结论 PES-1表达下调与2型糖尿病糖脂代谢有关。我们的研究表明,PES-1下调可以诱导机体甘油三酯异常升高,同时促进pepck和G6Pase表达显著上调,促进糖异生。这些发现可能为2型糖尿病脂代谢紊乱机制研究提供了新的研究靶点和今后临床研究提供新的思路。