内源激素与黄檗种子休眠解除的相关性研究

来源 :北京协和医学院中国医学科学院 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangke8611
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黄檗Phellodendron amurense Rupr.为芸香科黄檗属植物,以茎皮入药,为常用中药材关黄柏的基原植物。关黄柏清热燥湿,主下焦湿热,是一些常用方剂的主药。目前作为药用,关黄柏仍主要来源于野生黄檗资源,资源破坏十分严重,处于衰竭状态。黄檗已被列为国家一级重点保护野生药材物种、国家二级重点保护野生植物、中国珍稀植物。由于黄檗既是珍贵用材树种又是重要的中药材也是古老的残遗植物,因此,保护和研究黄檗具有重要科学意义。为了保护黄檗的野生资源及遗传多样性,在基础研究方面,进一步探究黄檗的生物学、生态学特性,深入分析黄檗的致危因素及解危方法,加强相关研究中定量指标体系的研究,以现代科学的方式阐释黄檗生长发育及更新的内在规律具有重要意义。为了探寻黄檗种子的休眠特性及其成因,对种子萌发过程中内源激素的动态变化进行研究十分必要。本文对黄檗种子四种内源激素的高效液相色谱分析进行了方法学探讨,对提取、纯化内源激素的方法进行了优化,建立了4种内源激素的HPLC检测方法,测得GA3、IAA、ABA、ZT的平均回收率分别为79.37%,86.70%,77.31%,90.07%。在对内源激素变化与种子休眠解除之间的关系的研究中,通过检测不同休眠程度的黄檗种子休眠解除过程中内源激素的含量变化,并与种子萌发率进行相关性分析发现,浅休眠种子在休眠解除过程中,GA3、IAA、ABA的含量与种子的萌发呈高度线性相关,相关系数分别为:RGA3=0.812,RIAA=0.834, RABA=-0.906;促进萌发激素之和与种子的萌发呈高度线性相关,相关系数分别为RZ+G+I=0.894. RZ+G=0.894;促进萌发与抑制萌发的激素的比值与种子的萌发呈高度线性相关,相关系数分别为RZT/ABA=0.875、RGA3/ABA=0.949、RIAA/ABA=0.935, RZ+G+I/A=0.938、 RZ+G/A=0.938,说明GA3、IAA、ABA及ABA与促进种子萌发的激素的相互消长,对浅休眠种子休眠的解除意义重大。中度休眠种子休眠解除过程,GA3、 ABA含量与种子的萌发呈高度线性相关和显著性相关,相关系数为RGA3=0.775, RABA=-0.527;促进萌发与抑制萌发的激素的比值与种子的萌发呈显著性相关和高度线性相关,相关系数分别为RZT/ABA=0.516. RGA3/ABA=0.901、Rz+G/A=0.808、 RZ+G+I/A=0.808,说明GA3、ABA及ABA与促进种子萌发的激素的相互消长,对中度休眠种子休眠的解除意义较大。深度休眠种子休眠解除过程中,来源于齐齐哈尔的种子IAA、ABA的含量与种子的萌发显著性相关,相关系数分别为RIAA=0.689, RABA=-0.650,促进萌发与抑制萌发的激素的比值与种子的萌发呈显著性相关,相关系数分别为RZT/ABA=0.700、RIAA/ABA=0.691、RZ+G+I/A=0.590,说明IAA、ABA及ABA与促进种子萌发的激素的相互消长,对来源于齐齐哈尔的种子休眠的解除意义较大。来源于北京药植所的种子IAA、GA3的含量与种子的萌发呈高度线性相关和显著性相关,相关系数分别为RIAA=0.928、RGA3=0.667,IAA/ABA、G+I、G+I/A含量与种子的萌发呈高度线性相关,相关系数分别为RIAA/ABA=0.812、RG+I=0.812、RG+I/A=0.812,说明IAA、GA3及ABA与促进种子萌发的激素的相互消长,对北京药植所种子休眠的解除意义较大。初步认为,浅休眠种子休眠解除与GA3、IAA、ABA及各激素间比值关系更为密切;中度休眠种子休眠解除主要与GA3、ABA及各激素间比值相关;深度休眠种子休眠解除与IAA、ABA及各激素间比值关系更为密切,此结论与课题组前期使用外源激素处理不同休眠程度的黄檗种子,相同激素对不同休眠程度种子的解除休眠效果不尽相同的结果相类似。本文还就层积处理过程中黄檗种子胚的显微特征进行了观察,发现种子胚的透明程度与种子休眠的解除具有一定的相关性。石蜡切片显微观察显示,随着层积时间的延长,胚轴的活动逐渐明显,下胚轴逐渐分化出中柱;胚中贮藏细胞内的油体体积变大,逐渐均匀分布,最后集中分布于细胞中央。胚在休眠解除过程中的形态变化主要表现在内部细胞的分化。
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