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高效液相色谱(HPLC)经过30多年的发展,在色谱理论研究、仪器研制水平、分析实践应用等方面都已取得很大的进步。从最初的层析法到经典的液相色谱,再到今天结合了经典液相色谱和气相色谱法理论的高效液相色谱,随着检测技术的改进液相色谱法的应用也变得十分普遍。譬如在医药领域、环保领域、卫生领域、化工领域等等。但是高效液相色谱法也和任何一种常用的分析方法一样,不可能十全十美,由于样品本身结构、状态及物化性质或者是检测方式不够完善,致使自然界中大量的物质在利用液相色谱法直接进行分离分析时表现出检测效果不佳甚至不能很好的检测出来。因此,探索研究灵敏度较高的检测方式在分析化学领域具有重要的实际意义。近年来,为了提高检测灵敏度,荧光性检测方式迅速发展,用于标记弱荧光和无荧光物质的标记试剂也相继开发出来并投入使用。对荧光标记试剂的研发也随之成为科研人员比较重视的方向。本论文主要设并计合成了两种新的荧光标记试剂,通过研究各探针分子的荧光性能、优化衍生条件、摸索液相色谱及质谱条件,从而确立一种衍生效率高、检测灵敏性强的高效液相色谱分离方法。整个实验研究过程中所做的工作如下: 第一章:大致阐述了荧光理论在高效液相色谱中的应用,简单介绍了荧光性物质的发光机理,概括性的总结了在利用液相色谱检测过程中常见的荧光标记试剂。 第二章:两种新型荧光标记试剂:9-氧代-10-苯基-4a,9,9a,10-四氢吖啶-2-碳酸、4-(1-甲基-1H-菲[9,10-D]咪唑-2-基)苯甲甲酰肼的设计合成及结构表征。 第三章:利用9-氧代-4a,9,9a,10-四氢吖啶-2-碳酸作为荧光标记试剂,用于脂肪醇的检测。通过优化反应条件、探究合适的色谱-质谱条件,从而在对柱前衍生处理过的脂肪醇类化合物进行分离时表现出较好的分离效果,在检测实际样品时可行性也是十分良好的。 第四章:利用标记试剂9-氧代-10-苯基-4a,9,9a,10-四氢吖啶-2-碳酸作为柱前衍生标记试剂,对脂肪胺进行高效液相色谱-质谱分析,在衍生条件优化好的前提下,利用高效液相色谱法对衍生过的脂肪胺进行检测,并此方法应用于实际样品的分离分析。结果呈现出灵敏度高、重现性好、操作简单等特点,适用于实际样品的分离分析。 第五章:以9-氧代-10-苯基-4a,9,9a,10-四氢吖啶-2-碳酸为柱前衍生试剂,利用高效液相色谱-质谱分析的方法对常见的酚类化合物进行检测。对衍生化反应条件和色谱-质谱条件优化后所建立了检测的方法适用于经过柱前衍生的酚类化合物的分离分析,该方法在对相关实际样品的检测过程中有着很好的重现性。