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背景与目的炎症性肠病(Inflammatory bowel disease,IBD)是一种病因不明的慢性复发性肠道炎症性疾病,正在成为一个全球性问题,尤其一些新兴工业化国家的发病率在过去的三十年中不断上升。多项研究均已证实IBD患者比普通人群患结肠炎相关肠癌(colitis-associated cancer,CAC)的风险更高。IBD患者发生CAC的风险与疾病持续时间、炎症程度(结肠炎症)呈正相关,尤其是病程大于10年的全结肠病变,提示结肠炎与CAC可能存在某种内在的相关性。CAC作为IBD致死的主要原因之一,因此急需有效地CAC预防策略。水飞蓟宾(silibinin,SB)是一种天然药用植物的提取物,具有抗炎、抗氧化、清除氧自由基、抗癌等多种作用,我们的前期试验结果显示其对葡聚糖硫酸钠(Dextran sulphate sodium,DSS)诱导的结肠炎小鼠肠道炎症有明显抑制作用,但该药对结肠炎相关肠癌的作用及相关机制尚需进一步论证,我们采用结肠癌前细胞系IMCE及结肠癌细胞系HCT-116以及氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠(AOM/DSS)诱导的结肠炎相关肠癌动物模型,进一步探讨水飞蓟宾对结肠炎相关肠癌的化学预防作用,及其对白细胞介素-6/信号转导及转录激活因子3(IL-6/STAT3,interleukin-6/Signal transducers and activators of transcription 3)通路的调节作用,为探寻防治CAC的新方法提供可靠的实验室依据。方法1、选用6周龄的C57BL/6小鼠适应环境饲养1周后,于7周龄开始进入实验,全程共10周。将实验小鼠随机分为三组:空白对照组,AOM/DSS组,水飞蓟宾治疗组(AOM/DSS/SB组)。空白对照组全程给予常规饮食及无菌水喂养;AOM/DSS组及AOM/DSS/SB组均于实验第一天给予AOM(10mg/kg)腹膜内注射1次,同时给予2%DSS(加入无菌水)饮用持续5天,随后16天饮用正常无菌水,每21天一个循环(5天DSS水+16天无菌水),共三个循环。水飞蓟宾治疗组同时全程给予水飞蓟宾750mg/kg/d每日灌胃。每周记录小鼠体重和大便次数及性状变化,第10周实验结束后处死小鼠,记录小鼠肠道肿瘤数目、直径、结肠长度和重量;HE染色进行组织学炎症和肿瘤评分;免疫组化染色检测各组小鼠结肠肿瘤细胞的增殖程度;用TUNEL方法判断各组小鼠结肠组织细胞的凋亡情况;免疫荧光方法评价紧密连接蛋白ZO-1的表达;Reatime-PCR方法检测细胞因子;免疫组化及Western blot方法评价水飞蓟宾对IL-6/STAT3通路的影响;2、用不同浓度梯度的水飞蓟宾作用于肠道肿瘤细胞(IMCE和HCT-116),采用MTT方法及Reatime-PCR方法以及Western blot方法检测水飞蓟宾对肠道肿瘤细胞的影响。结果:1、AOM/DSS小鼠模型实验结果显示:水飞蓟宾治疗组小鼠结肠肿瘤数量为(6.9±3.1)个/只,较AOM/DSS组(13.1±5.9)个/只明显减少,尤其肿瘤直径≧4mm的两组间差异显著(t=4.12,P<0.001);水飞蓟宾治疗组小鼠肠道组织Ki-67阳性细胞百分比,较AOM/DSS组明显减少,而TUNEL染色阳性细胞百分比,较AOM/DSS组明显增加;水飞蓟宾治疗组小鼠肠道炎症评分及肿瘤评分均明显低于AOM/DSS组;水飞蓟宾治疗组小鼠肠道组织中炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-αm RNA的表达量,均低于AOM/DSS组,而ZO-1的m RNA表达量明显高于AOM/DSS组;水飞蓟宾治疗组小鼠肠道组织磷酸化的STAT3表达水平相对值明显低于AOM/DSS组,而总STAT3蛋白表达水平两组间差异不显著。2、MTT实验结果显示水飞蓟宾能够明显抑制IMCE及HCT-116细胞的增殖活性,其IC50值分别为250μM和75μM;Realtime-PCR方法显示水飞蓟宾能够抑制LPS刺激的IMCE及HCT-116细胞炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的m RNA表达水平;Western blot实验也同样发现,水飞蓟宾可以明显抑制两种细胞STAT3的磷酸化水平,而总的STAT3水平无明显变化。结论:1、水飞蓟宾可以抑制结肠肿瘤细胞系的增殖活性,抑制结肠炎相关肠癌小鼠模型肠道粘膜组织的炎症,抑制肠道肿瘤的生长;2、水飞蓟宾可能通过下调IL-6/STAT3信号通路抑制结肠炎小鼠相关肠癌的发生发展;3、水飞蓟宾可能是一种潜在的CAC化学预防药物。