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背景： 阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)是一种常见的睡眠呼吸调节障碍性疾病。间歇性低氧是OSAS的主要病理生理学特点,同时也是引起高血压的重要因素之一。间歇性低氧引起的高血压与过度增强的交感神经活动有关,但中枢机制尚不明确。室旁核(PVN)是整合心血管活动的重要核团,PVN功能异常可能是导致间歇性低氧时交感神经活动增强的重要原因之一。活性氧(ROS)在间歇性低氧诱发高血压中起着重要作用,而中枢中的ROS可作为信号分子与间歇性低氧时高血压的产生有关。 目的： 1、探讨PVN中ROS在慢性间歇性低氧诱发高血压中的作用及其机制。 2、观察降低或清除ROS对慢性间歇性低氧诱发高血压的防治效果,为防治OSAS诱发的合并症提供依据。 方法： 实验采用慢性间歇性低氧模型,套尾法检测大鼠的尾动脉收缩压(SBP),在体记录大鼠的平均动脉压(MAP)、心率(HR)和肾交感神经活动(RSNA),使用立体定位仪进行核团微量注射,采用酶联免疫分析(ELISA)试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、NADHA氧化酶的活性和ROS的含量,以及Western Blot检测PVN中SOD和NADPH氧化酶的蛋白表达。 1、慢性间歇性低氧对大鼠血压和交感神经活动的影响 将雄性SD大鼠100只,体重220～250g,随机分成对照组(Control)和慢性间歇性低氧模型组(chronic intermittent hypoxia,CIH),Control组除不充入氮气和氧气外,其余均与CIH做相同处理。CIH组大鼠放入间歇性低氧舱内,向低氧舱循环充入氮气和氧气,共15天。观察慢性间歇性低氧对大鼠SBP、MAP和RSNA的影响。 2、慢性间歇性低氧对大鼠PVN中氧化应激水平的影响 使用MDA试剂盒分别检测Control组和CIH组大鼠PVN中丙二醛(MDA)的含量,观察慢性间歇性低氧是否引起大鼠PVN中氧化应激水平的升高。 3、慢性间歇性低氧对大鼠PVN中SOD和NADPH氧化酶的活性及蛋白表达的影响 使用ELISA试剂盒检测Control和CIH大鼠PVN中SOD和NADPH氧化酶活性的变化;使用Western Blot检测Control和CIH大鼠PVN中SOD和NADPH氧化酶蛋白表达水平。 4、急性改变PVN中ROS水平对大鼠MAP和RSNA的影响 实验分为对照组(Control)和慢性间歇性低氧模型组(CIH),分别在双侧PVN中注射超氧阴离子清除剂的类似物Tempol(0.2mol/L)、NADPH氧化酶抑制剂APO(0.01mol/L)和SOD的抑制剂DETC(0.1mol/L)改变ROS的水平,观察改变PVN中ROS的水平对大鼠MAP和RSNA的影响。 5、长期应用Tempol对慢性间歇性低氧大鼠血压和交感神经活动的影响 实验分为Control组、CIH组、Control+Tempol组和CIH+Tempol组四组。Control+Tempol组和CIH+Tempol组每天饮用含Tempol(2mmol/L)的饮用水,Control组和CIH组每天饮用自来水。观察Tempol通过降低ROS水平对慢性间歇性低氧大鼠血压和交感神经活动的影响。 6、长期应用Tempol对大鼠PVN中ROS水平的影响 实验分为Control组、CIH组、Control+Tempol组和CIH+Tempol组四组。使用ELISA试剂盒检测这四组PVN中ROS的含量,观察长期降低ROS水平对大鼠PVN中ROS水平的影响。 结果： 1.慢性间歇性低氧可以引起SBP、MAP和RSNA明显升高。 2.慢性间歇性低氧可以导致大鼠PVN中ROS水平的升高。 3.慢性间歇性低氧可使大鼠PVN中SOD的活性明显降低;而NADPH氧化酶的活性无明显变化。慢性间歇性低氧可引起SOD的表达显著下降,NDAPH氧化酶蛋白表达水平升高。 4.双侧PVN中注射超氧阴离子清除剂Tempol(0.2mol/L)和注射NADPH氧化酶抑制剂APO(0.01mol/L)均可以引起MAP、RSNA的明显下降;双侧PVN中注射SOD的抑制剂DETC(0.1mol/L)可引起MAP、RSNA明显增加。 5.长期应用Tempol,可以降低慢性间歇性低氧诱发的血压升高和交感神经活动增强,但不能降低到正常水平。 6.长期应用Tempol,可以降低慢性间歇性低氧导致PVN中ROS水平的升高,但未能恢复正常状态。 结论： 1.PVN中的ROS参与调节慢性间歇性低氧诱发高血压大鼠的血压升高和交感神经活动增强。 2.慢性间歇性低氧引起的PVN内ROS增加可能与NAD(P)H氧化酶功能上调和(或)SOD功能下调有关。 3.长期应用超氧离子清除剂Tempol,可显著抑制慢性间歇性低氧诱发的大鼠血压升高和交感神经活动过度增强,这种抑制作用可能与PVN中ROS水平的降低有关。