实时荧光定量PCR检测肺癌患者血浆循环DNA及其临床意义

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目的:定量检测肺癌患者血浆循环DNA并探讨其临床应用价值。 方法:收集86例肺癌、40例肺部良性疾病及97例健康志愿者的血浆样本,以“微量基因组DNA抽提试剂盒”抽提血浆DNA,以实时荧光定量PCR检测各组血浆循环DNA含量,并作受试者工作特征曲线。 结果:肺癌组、肺部良性疾病组和健康对照组血浆循环DNA中位数分别为19.85ng/ml、4.65ng/ml和3.2ng/ml,肺癌组血浆循环DNA明显高于健康对照组及肺部良性疾病组,差异有显著性(P=0.000);Ⅰ期肺癌患者血浆循环DNA中位数达14.7ng/ml,是肺部良性疾病组的3倍多,是健康对照组的4倍多,三组间差异有统计学意义(P=0.003)。所作受试者工作特征曲线下面积为0.879(95%可信区间为0.830~0.928):以≤10.75ng/ml作为临界值,血浆循环DNA对肺癌的敏感性为82.6%,特异性为84.7%。血浆循环DNA浓度与肺癌患者临床分期、肿瘤大小和血清CYFRA21-1密切相关(P=0.028,P=0.027,P=0.006),而与病理类型、肿瘤类型、组织学分级及外周血白细胞数无明显相关性(P=0.786,P=0.658,P=0.772,P=0.068)。肺癌患者术后血浆循环DNA水平明显低于术前(P=0.001),当肺癌复发时血浆循环DNA水平又升高,与术前比较无明显变化(P=0.893)。 结论:血浆循环DNA定量检测可以作为肺癌筛查与早诊、随访观察疗效和监测复发的指标。
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