论文部分内容阅读
本研究对贵州野生松乳菇[Lactarius deliciosus(Fr)Gray]水溶性多糖(SRG)的提取分离纯化进行研究,并初步探讨其多糖的抗氧化作用以及在降血脂、抗疲劳等方面的生物活性。一、松乳菇多糖提取分离纯化研究得到如下结果:1、松乳菇样品预处理70%乙醇浸泡的样品超声30 min后静置24 h。2、松乳菇多糖的热水浸提工艺热水浸提工艺条件:提取温度90℃、浸提时间3 h、料液比1:30、浸提次数3次,浸提率达到7.55%。3、松乳菇多糖的酶解+热水浸提法工艺酶解反应工艺条件为:固液比:1:20,反应温度:50℃,反应时间:2 h,提取次数:2次,加酶量:0.4%。酶解反应结束后升温至70℃,提取残渣中多糖采用70℃热水,浸提2 h,固液比为1:20,浸提一次,最终提取率可达13.31%。4、松乳菇多糖的活性炭脱色效果1%的活性炭在30℃下,脱色90 min,可脱去大部分色素而多糖的损失率则小于15%。5、乙醇沉淀条件及效果70%乙醇沉淀松乳菇多糖溶液,沉淀率可达81.9%。6、大孔树脂纯化松乳菇多糖选用AB-8型(规格30 mm×300 mm)大孔吸附树脂对松乳菇多糖进行分离纯化。纯化条件为:上样浓度:0.2 mg/mL;洗脱速度:2 mL/min;NaCl溶液浓度:0.2 mg/mL。可把含量为61.3%粗多糖提高至含量为81.5%。7、松乳菇多糖的DEAE-纤维素柱分离纯化的松乳菇多糖上DEAE-纤维素柱,用不同洗脱液洗脱,蒸馏水洗脱得一种中性多糖SRG-1,0.1 mol/L、0.2 mol/L和0.3 mol/L NaCl溶液分别洗脱得三种不同的酸性多糖SRG-2、SRG-3、SRG-4。8、松乳菇多糖的单糖组分研究采用气相色谱法测定SRG-2的单糖组分,结果表明其主要是由D-甘露糖、D-半乳糖、D-葡萄糖、D-木糖、D-阿拉伯糖、D-岩藻糖六种单糖组分组成。二、松乳菇多糖生物活性研究得到如下结果:1、松乳菇多糖抗氧化性试验结果:SRG对超氧阴离子自由基、羟基自由基、DPPH自由基皆表现出很好的清除效果,100μg/mL样品浓度的清除率分别达到了76.8%,80.1%,72.6%。2、松乳菇多糖的降血脂试验结果:采用高、中、低浓度的松乳菇多糖饲养小鼠,结果表明低剂量组小鼠血清中TC, LDL-C, TG值与模型组比较分别降低了:19.8%,27.2%,25.9%。中剂量组小鼠血清中TC, LDL-C, TG值与模型组比较分别降低了:31.7%,36.8%,42.4%。高剂量组小鼠血清中TC, LDL-C,TG值与模型组比较分别降低了:32.7%,39.2%,43.0%。3、松乳菇多糖的抗疲劳试验结果:采用高、中、低浓度的松乳菇多糖为受试物,结果表明其中低剂量SRG组、中剂量SRG组与高剂量SRG组比对照组负重游泳的时间分别延长15.9%,32.8%,45.9%。4、通过生物活性实验,结果显示松乳菇多糖抗氧化作用明显及在降血脂、抗疲劳等方面均表现出明显的促进作用。