【摘 要】
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目的探讨Shh信号传导途径在原代培养皮层星形胶质细胞氧化应激中的保护作用。方法本实验在华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室及神经内科实验室完成。1.取出生后1
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目的探讨Shh信号传导途径在原代培养皮层星形胶质细胞氧化应激中的保护作用。方法本实验在华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室及神经内科实验室完成。1.取出生后1-3天SD新生鼠皮层胶质细胞进行培养,并给予过氧化氢模拟氧化应激,用Real-time PCR以及Western-blot检测内源性Shh、Patched、Gli-1的表达;2.原代培养的皮层星形胶质细胞氧化应激中给予外源性Shh,及Shh信号传导通路阻滞剂Cyclopamine或5E1处理,用MTT方法观察细胞的活力;用流式细胞仪检测细胞凋亡状况;3.用RT-PCR和Western-blot观察药物处理后细胞中Bcl-2和Bax的表达变化。结果1.皮层星形胶质细胞氧化应激时内源性Shh、Patched、Gli-1的表达上调;2.给予外源性Shh可明显增加皮层星形胶质细胞氧化应激时细胞的存活力,减少细胞的凋亡,Cyclopamine或5E1可部分抑制该作用;3.外源性的Shh可上调细胞中Bcl-2的表达而下调Bax的表达,Cyclopamine可部分抑制该作用。结论氧化应激可以促进Shh的表达上调,重新激活Shh信号传导途径,可观察到Patched、Gli-1的表达上调;外源性给予Shh可增加原代培养的皮层星形胶质细胞氧化应激中的存活能力,并能够抑制其凋亡,具有神经保护作用。
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