创伤后膝关节僵直及康复治疗对肌肉组织炎性细胞因子表达水平的影响

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目的:探讨创伤后膝关节僵直及康复治疗过程中关节周围肌肉组织内炎性细胞因子表达的变化规律。  方法:(1)实验动物:选取36只9周龄、重约300~400g的雄性SD大鼠。(2)建立膝关节僵直模型:采用10%水合氯醛0.5ml/100g腹腔麻醉。首先将36只实验大鼠于右侧股骨外侧髁用骨凿切除2×2mm2皮质窗,并用克氏针穿胫骨和股骨将膝关节固定在伸直位4周,制造创伤后膝关节僵直模型。(3)观察模型指标:于术后4周,36只大鼠全部取出克氏针。随机抽取4只,分别取股四头肌,腓肠肌进行IL-1,IL-2,TNF-α,COX-1及COX-2的免疫组化染色积分光密度(Integrationopticaldensity,IOD)测定及荧光定量PCR的mRNA转录水平测定。同时将其余大鼠随机分为两组,即观察组和康复组。于8,12,16,20周时各随机抽取4只,分别取股四头肌,腓肠肌进行IL-1,IL-2,TNF-α,COX-1及COX-2的免疫组化染色IOD测定及荧光定量PCR的mRNA转录水平测定。(4)康复治疗:康复组中16只大鼠,给予被动活动(上午、下午各一次,10min/次)及SLY-RTML六道动物跑台(上午、下午各一次,15min/次)康复治疗。  结果:(1)康复组与观察组比较,TNF-α在各试验阶段免疫组化染色IOD测定及荧光定量PCR的mRNA转录水平测定均无明显差异,无统计学意义(P>0.05)。(2)康复组与观察组比较,IL-1,IL-2在0~12周时免疫组化染色IOD测定及荧光定量PCR的mRNA转录水平测定均无明显差异,无统计学意义(P>0.05)。但12周以后康复组IL-1,IL-2测定值明显降低,康复组与观察组比较,存在明显差异,具有统计学意义(P<0.05)。(3)COX-1,COX-2在0~8周时免疫组化染色IOD测定及荧光定量PCR的mRNA转录水平测定均升高,康复组与观察组比较,无明显差异,无统计学意义(P>0.05)。康复组COX-1,COX-2在8周以后测定值呈下降趋势,康复组与观察组比较,存在明显差异,具有统计学意义(P<0.05)。(4)股四头肌与腓肠肌结果一致。  结论:膝关节创伤后造成僵直,在康复治疗过程中,肌肉细胞中IL-1,IL-2,COX-1及COX-2炎性细胞因子表达呈现先持续升高后逐渐降低,直至正常。表明在康复治疗初期,膝关节周围肌肉组织炎症反应强烈,水肿、纤维化、挛缩持续加重,给保持康复治疗效果带来一定困难。在临床工作中发现,康复治疗初期,经常会遇到康复治疗效果“反弹”的现象,即关节ROM较术中、术后早期不同程度减少。通过本研究发现,康复治疗初期周围肌肉组织炎症反应持续强烈,可能是“反弹”现象出现的原因之一。但随着康复治疗继续进行,周围肌肉组织炎症反应逐渐减弱,甚至消失,随之康复治疗效果逐渐明显。
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