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目的： 研究一贯煎对纤维化肝脏肝祖细胞分化的调控及其机制。 方法： 首先建立CCl4/2-AAF Wistar雄性大鼠纤维化模型，采用Wistar雄性大鼠，30％CCl4-橄榄油溶液2ml·kg-1进行皮下注射，每周2次，第7周开始在CCl4造模的同时，予以2-AAF10mg·kg-1灌胃，1次/d，共14天（至第9周末），制备CCl4/2-AAF大鼠肝纤维化模型。 从造模第7周开始，将模型大鼠随机分为CCl4组，CCl4/2-AAF组，Dlk-1+胎肝干细胞组(FLSPC)，Dlk-1+胎肝干细胞+一贯煎组(FLSPC+YGJ)和Dlk-1+胎肝干细胞组+索拉菲尼(FLSPC+SORA)。在造模的同时，各干预组经脾脏注射Dlk-1+FLSPC，并分别以蒸馏水、一贯煎和索拉菲尼灌胃治疗，正常组(N)和模型对照组(CCl4/2-AAF)以等体积蒸馏水灌胃。至9周末杀鼠取材，检测肝组织α-SMA、ColⅠ、Hep、HNF-4α、CK-7蛋白和mRNA表达，并检测Wnt信号通路相关分子的表达水平。体外实验模拟体内过程，采用脂多糖(LPS)激活巨噬细胞株，模拟体内炎性微环境，将肝卵圆细胞株(WB-F344)与巨噬细胞株共培养，分为未激活的巨噬细胞株+卵圆细胞组(N); LPS处理8小时后的巨噬细胞株+卵圆细胞组(M);一贯煎+LPS处理8小时后的巨噬细胞株+卵圆细胞组(YGJ);Lenalidomide+LPS处理8小时后的巨噬细胞株+卵圆细胞组(Lenalidomide)。共培养7d，分别收集其培养上清，α-SMA、CD68、CD163、TNF-α、TGF-β、PDGF、IL-1蛋白及mRNA表达，以及Wnt信号通路相关分子的表达水平。 结果： 体内实验:qRT-PCR检测结果显示:(1)与CCl4/2-AAF组比较，FLSPC组Dlk-1mRNA表达显著上调(p＜0.05)，FLSPC+YGJ组和FLSPC+SORA组Dlk-1mRNA水平显著下降(p＜0.05)。与CCl4/2-AAF组比较，FLSPC、FLSPC+YGJ和FLSPC+SORA组肝组织α-SMA及ColⅠ表达显著下调(p＜0.05)，尤其以FLSPC+ YGJ组最为显著。与CCl4/2-AAF组比较，FLSPC+YGJ和FLSPC+SORA组肝细胞标记物Hep和HNF-4α表达显著上调(p＜0.05);胆管上皮细胞标记物CK19表达显著下降(p＜0.05)，FLSPC组有下降趋势，但无显著统计学差异(p＞0.05)。各干预组CD68、TNF-α、TGF-β mRNA表达水平均较CCl4/2-AAF组显著下降(p＜0.05)，尤其以FLSPC+YGJ和FLSPC+SORA组下降最为明显;各干预组CD163mRNA表达水平均较CCl4/2-AAF组显著增加(p＜0.05)。 (2)与CCl4/2-AAF组比较，各干预组经典Wnt信号通路关键分子β-Catenin、FZD1、FZD4、FZD5和LRP5 mRNA表达水平显著增加(p＜0.05或p＜0.01);非经典Wnt信号通路关键分子Wnt4A、Wnt5A、FZD2和FZD3 mRNA表达水平显著降低(p＜0.05或p＜0.01)。 蛋白印迹检测结果显示:与CCl4/2-AAF组比较，FLSPC+YGJ和FLSPC+SORA组α-SMA、ColⅠ、CK7蛋白表达显著减少(p＜0.05);且CK7在FLSPC组表达亦显著降低(p＜0.05)。与CCl4/2-AAF组比较，FLSPC+YGJ和FLSPC+SORA组HNF-4α蛋白表达显著增加(p＜0.05)。 体外实验:分别采用不同浓度LPS(50ng·ml-1，100ng·ml-1，200ng·ml-1)处理巨噬细胞株，2h后细胞中TNF-α、TGF-β、PDGF、IL-1均显著上升(p＜0.05)，且巨噬细胞株形态也发生了改变。ELISA检测了巨噬细胞株经不同浓度LPS处理8h后分泌TNF-α的情况，发现200ng·ml-1 LPS并没有增加TNF-加的分泌量，因此本研究选用100ng·ml-1的LPS激活巨噬细胞株，显微镜下观察发现巨噬细胞株在LPS(100ng·ml-1)刺激48h发生形态学改变。同时采用免疫荧光检测LPS（100ng·ml-1）处理48h是否会刺激WB-F344细胞株向肌成纤维细胞或巨噬细胞分化，结果表明WB-F344细胞株的α-SMA和CD68表达无明显改变。巨噬细胞株与WB-F344细胞株共培养7d时，卵圆细胞(WB-F344)形态发生明显改变，免疫荧光显示卵圆细胞(WB-F344)α-SMA表达显著增加(p＜0.05)，且第3d、5d、7d时，α-SMA在mRNA水平表达呈逐渐增加趋势，且各时间点比较均具有显著统计学差异(p＜0.05)。 qRT-PCR检测显示，巨噬细胞株与WB-F344细胞株共培养第7d后，与M组比较， YGJ和来那度胺(Lenalidomide)组经典Wnt信号通路Wnt3A、LRP5、LRP6、β-Catenin mRNA表达上升(p＜0.05); YGJ组和Lenalidomide非经典信号通路Wnt5B、Wnt4、mRNA表达显著下调(p＜0.05)。 结论： FLSPC移植能够有效促进肝损伤修复，一贯煎对肝脏自体干细胞及移植FLSPC的分化均有调控作用，其主要机制与调控巨噬细胞亚群平衡进而调节Wnt信号通路有关，为其临床应用提供了科学证据。