论文部分内容阅读
纳米硒（Nano-Se）是以蛋白质为分散剂的单质硒纳米粒子。本课题以纳米硒为试验材料，用硒代蛋氨酸（Se-Met）和亚硒酸钠（Na2SeO3）为对照，在雏鸡肾细胞和Avian肉鸡上研究了纳米硒对细胞谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性以及鸡体的抗氧化能力、免疫机能、激素含量、组织硒水平、肌肉品质和生长性能的影响，并探讨了纳米硒对肉鸡肝脏组织GPx和IDⅠ mRNA丰度的影响。以含5％胎牛血清的M199为基础细胞培养液，每种硒源设0.01，0.05，0.10，0.20，0.30μmol/L5个浓度梯度，每个浓度梯度设三个重复，并设一个空白浓度，分别测定培养24h、48h、72h、96h后的细胞内GPx活性。饲养试验中三种硒源均以0.10，0.20，0.30，0.40，0.50mg/kg硒添加水平添加到基础日粮中，配制成15种试验日粮。选择健康Avian商品代公母混合雏2160羽，按试验要求共分为16组（含一个基础日粮组），每组3个重复，每个重复45羽，饲养试验为期6周。饲养试验结束后，每组各选体重相近的肉鸡（公母各半）6羽，共96羽，屠宰，取相关血清和组织样品进行抗氧化指标、免疫学指标、肉质指标、组织硒水平、血清激素水平和肝脏组织GPx、IDⅠ活性以及肝脏组织GPx、IDⅠ mRNA丰度的测定。获得以下主要结果： 1、细胞培养试验表明，在0.01～0.10μmol/L浓度范围内，相同硒浓度下三种硒源之间在细胞GPx的活性上无明显差异（p＞0.05），GPx的活性随培养液中硒浓度的增加而提高，显示出良好的效应—剂量关系；亚硒酸钠在培养液中的硒浓度＞0.10μmol/L、硒代蛋氨酸＞0.20μmol/L时，对细胞GPx活性具有抑制作用，并随着硒浓度增加和培养时间的延长愈发强烈；而纳米硒在0.10～0.30μmol/L硒浓度范围内，细胞GPx活性始终保持在高峰平台，显示了其安全性较高，适宜添加剂量范围较宽。 2、饲养试验显示，饲料中硒添加水平≤0.40mg/kg时，三种硒源对肉鸡生长性能的影响无明显差异（p＞0.05）；硒添加水平提高到0.50mg/kg时，纳米硒组肉鸡生长性能显著地高于硒代蛋氨酸组和亚硒酸钠组（p＜0.05）。 3、肉鸡抗氧化能力分析揭示，硒添加水平≤0.40mg/kg时，三种硒源同一添加水平上对肉鸡血清和组织中GPx活性和总抗氧化能力（T-AOC）的影响无显著性差异（p＞0.05）。添加0.50mg/kg硒时，硒代蛋氨酸组和亚硒酸钠组的GPx活性和T-AOC与同硒源0.40mg/kg硒添加水平相比显著下降（p＜0.05），机体中活性氧水平和丙二醛（MDA）含量显著升高（坏0.05）;而纳米硒组无明显变化。 4、肉鸡胸肌肌肉品质的分析可见，在添加0.50mg/kg硒时（高剂量），纳米硒与硒代蛋氨酸和亚硒酸钠相比，显著降低了肌肉滴水损失（尽0.05）、提高了肌肉红色色度（坏0.05）、增加了肌肉中肌红蛋白含量（尽0.05）。 5、血清免疫指标测定表明，在硒添加水平为0.20，0.30，0.40，0.50 mg/kg时，纳米硒组血清IgG含量显著高于硒代蛋氨酸组和亚硒酸钠组（坏0.05），血清工gM含量显著高于亚硒酸钠组（坏0.05）;血清工gA含量三种硒源间无显著差异（P>0.05）。 6、在0.50 mg/kg硒添加水平时，纳米硒使血清胰岛素（Insulin）水平显著高于两个对照组（尽0.05）。 7、三种硒源在血清T3、T4、TSH水平，肝脏组织IDI活性和组织硒含量等指标上无显著差异（P>o.05）。 8、分子生物学的试验结果表明，0.50 mg/kg硒添加水平时，纳米硒组CGPx mRNA丰度比亚硒酸钠组高31.25%（尽0.05），比硒代蛋氨酸组高25.00%（尽0.05）。三种硒源对肉鸡肝脏组织ID 1 mRNA丰度的影响无显著差异（沪0.05）。 本研究结果提示:（l）纳米硒作为硒源在抗氧化能力、提高肉鸡生长性能、体液免疫效能和改善肌肉品质等方面表现出更强的营养生物学作用;（2）纳米硒调控肉鸡肝脏组织CGPx mRNA稳定性的能力更强;（3）纳米硒的weinberg剂量一效应的最适剂量范围宽于硒代蛋氨酸和亚硒酸钠，显示出对动物的安全性更高，这对于饲料新硒源的开发利用具有实践意义。