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研究背景:酯酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(Acyl Coenzyme A:Cholesterol Acyltransferases 1,ACAT1)是一种胆固醇催化酶,主要在将细胞内的游离胆固醇酯化成为胆固醇酯的过程中发挥关键酶的作用,并以酯滴的形式将胆固醇酯储存在细胞内,因此具有调节巨噬细胞细胞内胆固醇代谢的作用。ACAT1可增加细胞内胆固醇的流入,促进酯化反应,在促进单核细胞分化为巨噬细胞,并向泡沫细胞转化过程中起着重要作用,因此可以影响动脉粥样硬化的进程,促进冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary heart disease,CHD)的发生。流行病学研究显示,冠心病是一种由多致病因素共同作用引起的疾病,是一个或多个致病基因的改变与后天环境以及各危险因素相关作用的结果;由此推测ACAT1基因的突变以及酶含量和活性的改变可能与冠心病的发生关系密切。目前ACAT1基因启动子区域基因多态性及外显子的错义突变与血脂、高血压及冠心病的关系研究相对缺乏。目的:ACAT1基因单核苷酸多态性(SNP)是基因变异最主要的方式;本研究查询NCBI及UCSC数据库中最小等位基因频率(Minor Allele Frequency,MAF)值,选择ACAT1基因启动子区域及外显子的错义突变中MAF最大的两个位点(Rs11545566、Rs13306731)进行研究,旨在了解中国汉族人群两位点SNP的频率分布特点,及其与血脂、冠心病的关系,为以后基因诊断和治疗提供依据。方法:选择2014-06至2014-11四川汉族人群232例为研究对象,其中正常对照组104例,冠心病组128例。所有患者均完善冠脉造影检查,并依据冠脉造影检查结果诊断冠心病。排除标准:恶性肿瘤、糖尿病、严重肝肾功能损害、心肌病、心肌桥、恶性心律失常等。完善肝肾功能、血脂、血糖检测,抽取静脉血2-3ml后,使用dna提取盒提取dna,使用perkin-elmergeneamppcrsystems进行基因型检测,再采用软件分析统计学数据。基因型频率的分布使用hardy–weinberg平衡检测,连续性资料用均数±标准差来描述,分类资料采用频数和构成比进行描述,连续性资料组间比较采用秩和检验,分类资料组间比较则采用卡方检验,各基因型对冠心病的易感性使用优势比和95%置信区间(95%ci)评估。定义本研究中所有的统计分析结果p<0.05时方具有显著统计学差异。结果:1、我国四川地区汉族人acat1基因rs11545566、rs13306731位点全部检测人群(χ2=0.212,0.149,df=1,p=0.900,0.985)及男女性别组间(χ2=0.04,0.258vs0.969,3.554,df=1,p=0.841,0.611vs0.325,0.059)基因型频率分布符合hardy-weinberg平衡检测,具有人群代表性。两位点正常对照组等位基因频率(χ2=0.361,3.621,df=1,p=0.508,0.057)均符合hardy-weinberg平衡检测,可认为具有人群代表性。2、acat1基因rs11545566位点及rs13306731位点基因突变后等位基因频率的改变与冠心病的发病机率不相关(p=0.492,0.597),t基因携带者患chd的风险与非t基因携带者相比较无显著差异(oddsratio=1.1377,95%ci=[0.787~1.644]);g基因携带者患冠心病的风险与非g基因携带者相比较无显著差异(oddsratio=1.114,95%ci=[0.747~1.663])。3、rs11545566snp位点各基因型的频率分布比较无明显差异(p=0.895);rs13306731snp位点各基因型的频率分布比较差异具有统计学意义(p<0.05);rs11545566snp位点基因分布构成比的组间比较差异无统计学意义(χ2=0.997,p=0.608),rs13306731snp位点基因分布构成比的组间比较差异具有统计学意义(χ2=11.647,p=0.003)。4、男女组间两snp位点的等位基因频率分布差异不显著(p=0.720,0.994),t基因携带者患冠心病的风险与非t基因携带者相比较无显著差异(oddsratio=0.933,95%ci=[0.640~1.361]);g基因携带者患冠心病的风险与非g基因携带者相比较无显著差异(oddsratio=0.998,95%ci=[0.662~1.506]);各基因型的频率分布差异不显著(p=0.611,0.107);正常对照组与冠心病组间比较,两位点snp的基因型别差异均不显著,所有p值均大于0.05。正常对照组与冠心病组间是否吸烟、是否饮酒在各基因型中的频率分布也无差异(所有p>0.05)。5、正常对照组、冠心病组间rs11545566位点基因多态性的改变与血脂水平及载脂蛋白水平均无相关性(所有p>0.05);rs13306731位点基因多态性与血脂水平无明显相关性(所有p>0.05),与载脂蛋白a-i、载脂蛋白b水平密切相关(p=0.009,0.041)。6、hdl-c水平>1mmol/l组中,rs11545566位点基因突变后等位基因及各基因型频率的改变与冠心病的发病机率不相关(p=0.578,0.576);t基因携带者患冠心病的风险与非t基因携带者相比较无显著差异(oddsratio=0.875,95%ci=[0.547~1.398];rs13306731位点基因突变后等位基因频率的改变与冠心病的发病机率不相关(p=0.330),g基因携带者患chd的风险与非g基因携带者相比较无显著差异(oddsratio=1.293,95%ci=[0.770~2.171]);但rs13306731位点gg基因型的改变增加了罹患冠心病的机率(p=0.012);低hdl-c水平组(hdl-c≤1mmol/l),rs11545566位点基因突变后等位基因频率的改变与冠心病的发病机率不相关(p=0.093,0.144);t基因携带者患冠心病的风险与非t基因携带者相比较无显著差异(oddsratio=1.744,95%ci=[0.909~3.347];rs13306731位点基因突变后等位基因频率的改变与冠心病的发病机率不相关(p=0.380,0.565);g基因携带者患冠心病的风险与非g基因携带者相比较无显著差异(oddsratio=0.727,95%ci=[0.357~1.483])。7、冠心病不合并高血压组与冠心病合并高血压组两组间rs11545566、rs13306731基因多态性各等位基因频率分布无明显差异(p=0.912,0.440);两组间rs11545566、rs13306731基因多态性各基因型的频率分布亦无明显差异(p=0.945,0.193)。8、稳定性心绞痛组与急性冠脉综合征组两组间rs11545566、rs13306731基因多态性各等位基因频率分布无明显差异(p=0.233,0.707),两组间rs11545566、rs13306731基因多态性各基因型的频率分布亦无明显差异(p=0.481,0.927)。结论:1、本研究揭示了acat1基因rs11545566、rs13306731位点的基因多态性改变在汉族人群中的频率分布情况。2、rs11545566位点基因c突变为t后并未导致冠心病易感性的增加,多态性与血脂及载脂蛋白水平无明显相关性。3、rs13306731位点基因a突变为g后,冠心病的易感性增加了,其基因多态性与载脂蛋白a-i、载脂蛋白b水平的变化密切相关。4、rs11545566、rs13306731位点基因突变与冠状动脉粥样硬化严重程度无明显相关性。