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本研究旨在观察慢性乙肝(chronic hepatitis B，CHB)患者外周血mDCs和T淋巴细胞B7-H1(B7-homolog 1)及其受体PD-1(programmed death 1)的表达变化特点以及与患者疾病状态的关系；研究CHB患者mDCs和T淋巴细胞上B7-H1/PD-1表达变化对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)特异性T淋巴细胞功能的影响，阐明HBV慢性感染T细胞免疫功能下降的分子机制；探讨接受干扰素治疗的CHB患者B7-H1的表达变化特点及其与患者疗效之间的关系。我们收集临床CHB患者外周血标本35份、健康人和自身免疫性肝炎患者外周血标本各10份，应用流式细胞技术分析外周血中mDCs和T淋巴细胞上B7-H1/PD-1的表达水平。结果显示，CHB患者和自身免疫性肝炎患者mDCs和T淋巴细胞上B7-H1的表达水平都明显高于健康对照，T淋巴细胞上PD-1的表达水平也都高于健康对照；我们发现，细胞因子IFN-α和IFN-γ可以在体外刺激健康人外周血mDCs和T淋巴细胞上B7-H1的表达，而对PD-1的表达没有明显的促进作用；另外，HBcAg对B7-H1的表达几乎也没有影响。我们推测CHB患者和自身免疫性肝炎患者B7-H1表达水平的升高可能与炎症因子的作用有关。结合CHB患者的临床资料，我们发现患者B7-H1/PD-1表达水平与ALT水平及HBV DNA载量都呈明显的正相关，说明B7-H1/PD-1的表达水平与CHB患者的疾病状态有密切关系。在此基础上，我们进一步研究了B7-H1/PD-1抑制途径增强对CHB患者细胞免疫功能的影响。MDC在呈递抗原和效应T细胞的调节方面发挥了关键作用，研究显示，CHB患者mDCs功能受损可能是HBV特异性T淋巴细胞免疫功能降低的重要原因。因此mDCs上B7-H1表达上调对T细胞功能的影响成为本研究的重点。我们用患者及健康人的mDCs与非自体健康人的CD4~+或CD8~+T细胞混合培养，采用[~3H]-TdR掺入法和ELISA法检测细胞的增殖和细胞培养上清中细胞因子的浓度，并观察阻断B7-H1抑制途径的效果。发现患者的mDCs刺激异源性CD4~+或CD8~+T细胞增殖的能力和分泌Ⅰ型细胞因子的能力比健康人的mDCs明显降低；而阻断mDCs和T细胞之间的B7-H1/PD-1途径可以恢复患者mDCs对T细胞的刺激能力。我们还发现阻断B7-H1/PD-1抑制途径，细胞培养上清中IL-12的浓度明显升高，而IL-10的浓度则明显降低，说明阻断B7-H1/PD-1抑制途径，增强了mDCs与T细胞之间的相互作用能力，免疫功能得到部分恢复。我们进一步研究了B7-H1/PD-1途径对HBV特异性T淋巴细胞免疫功能的影响。我们用HBcAg负载的MoDCs和自体T淋巴细胞混合培养，检测HBV特异性T淋巴细胞增殖的能力和产生Ⅰ型细胞因子的能力，同时观察阻断B7-H1/PD-1抑制途径的效果。结果显示，阻断B7-H1/PD-1途径能够明显提高抗原特异性T细胞的增殖以及Ⅰ型细胞因子的产生；同时发现阻断B7-H1/PD-1抑制途径，细胞培养上清中IL-12浓度明显升高，而IL-10浓度明显降低。我们还采用Elispot及细胞内因子染色法进一步断定了B7-H1/PD-1途径对HBV特异性T淋巴细胞IFN-γ产生的影响。以上结果说明，CHB患者mDCs和T细胞上B7-H1/PD-1表达水平升高是CHB患者病毒特异性T细胞免疫功能降低的一个重要因素。鉴于CHB患者T淋巴细胞上B7-H1和PD-1表达水平都有明显升高，我们初步探讨了T细胞之间的B7-H1/PD-1途径对T细胞功能的影响。我们用CFSE标记检测T细胞增殖，发现阻断T细胞之间的B7-H1/PD-1途径可以提高患者T细胞的非特异性和特异性增殖，并且细胞内因子染色发现抗原特异性T细胞IFN-γ的产生也明显增多。说明CHB患者T细胞之间的B7-H1/PD-1抑制途径也能够影响T细胞的效应功能。最后我们对干扰素治疗的CHB患者mDCs和T细胞上B7-H1的表达特点进行了动态观察，并分析了B7-H1的表达与干扰素治疗效果的关系。发现患者接受干扰素治疗后，B7-H1的表达会出现升高，但随着治疗时间的延长，干扰素治疗反应者B7-H1的表达水平下降，而治疗无反应者B7-H1一直持续高水平表达。我们比较了治疗反应者和无反应者治疗前和治疗24周后HBV特异性T细胞产生IFN-γ的能力，发现治疗反应者HBV特异性T细胞IFN-γ的产生频数治疗后比治疗前明显增多，而治疗无反应者则明显降低；阻断治疗反应者及无反应者细胞间的B7-H1/PD-1抑制途径，HBV特异性T细胞IFN-γ的产生频数均明显升高。因此干扰素治疗慢性乙肝B7-H1表达水平的升高可能会影响干扰素的治疗效果。总之，CHB患者B7-H1及PD-1表达水平的升高可能是介导HBV特异性T细胞功能降低的重要原因，而阻断B7-H1/PD-1抑制途径可以增强HBV特异性T细胞的免疫功能；B7-H1表达水平的升高可能会影响干扰素对慢性乙肝的治疗效果。研究结果对于阐明慢性乙肝病毒特异性T细胞耐受的机制以及指导慢性乙肝的临床免疫治疗具有重要意义。