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本文主要从以下几部分展开：
第一部分：
目的：
急性下呼吸道感染(acute lower respiratory tract infections，ALRI)是婴幼儿时期的主要死亡原因，其主要的致病因子为病毒，因此明确ALRI患儿病毒感染情况对ALRI的病因诊断和防治将有重要的意义。本文的目的是研究北京儿童医院5岁以下儿童ALRI住院患儿中病毒感染情况及其临床特征。
方法：
1.收集2004年～2006年冬季(11月至次年2月)因ALRI在北京儿童医院住院治疗的5岁以下患儿鼻咽吸出物333份，男230例，女103例，年龄为1月至58月。
2.同时采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)扩增技术和病毒分离方法对标本进行呼吸道病毒检测，将PCR阳性扩增产物和分离获得的阳性毒株测序进行鉴定。
3.检测的呼吸道病毒包括呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial vires，RSV)、腺病毒(adenovirus，AdV)、副流感病毒1～4型(parainfluenza virus，PIV)、鼻病毒(rhinovirus，RhV)、人偏肺病毒(human metapneumovirus，hMPV)、冠状病毒(human coronavirus，HCoV)及人博卡病毒(human bocavirus，HBoV)7种病毒，采用HEp-2和Vero两种细胞对鼻咽吸出物进行病毒分离。
结果：
1.333份鼻咽吸出物中病毒检测为阳性的标本共123份，病毒总的阳性检出率为36.94％(123/333)。123份阳性标本中，采用PCR方法检测阳性的为121份，其中9份合并病毒分离阳性；另有2份PCR阴性标本，病毒分离阳性。
2.病毒分离情况：采用HEp-2和Vero两种细胞进行病毒分离得到11株病毒株，经PCR扩增及序列测定检测证实均为AdV，其中AdV1型2株，AdV2型3株，AdV3型3株，AdV7型3株。
3.阳性标本中单纯RSV阳性标本90例，占阳性标本总数的73.17％(90/123)；单纯AdV阳性7例，占5.69％(7/123)；单纯HBoV阳性13例，占10.57％(13/123)；单纯RhV阳性1例，占0.81％(1/123)；RSV合并AdV感染9例，占7.32％(9/123)；RSV合并HBoV感染3例，占2.44％(3/123)。未检测到副流感病毒、人偏肺病毒及冠状病毒感染。
4.病毒检测阳性患儿的中位年龄为5.5月(年龄为1.6月至58月，平均年龄为10.5月)。其中年龄为6月以下70例，占阳性病例的56.91％(70/123)；6月～1岁26例，占21.14％(26/123)；1～3岁20例，占16.26％(20/123)；3岁以上7例，占5.69％(7/123)。所有病毒检测阳性患儿临床均有咳嗽及胸片异常表现，发热占86.99％(107/123)，喘息占77.24％(95/123)。临床诊断为肺炎60例(48.78％，60/123)，毛细支气管炎50例(40.65％，50/123)，急性支气管炎9例(7.32％，9/123)，哮喘合并肺炎1例(0.81％，1/123)，哮喘合并支气管炎3例(2.44％，3/123)。临床诊断为重症ALRI 10例，占重症患儿的33.33％(10/30)；轻症ALRI 113例，占轻症患儿的37.29％(113/303)。
结论：
1.病毒是北京儿童医院2004年～2006年冬季ALRI住院患儿的重要病原。
2.RSV感染在病毒感染中占首位；AdV感染存在，感染的血清型包括AdV1型、2型、3型及7型；HBoV可能是ALRI的重要病原。
第二部分：
目的：人博卡病毒(Human Bocavirus，HBoV)是2005年新发现的可引起儿童及成人呼吸道疾病的细小病毒。本文的目的是研究北京儿童医院5岁以下儿童急性下呼吸道感染(acute lower respiratory tract infections，ALRI)住院患儿中HBoV感染的分子流行病学特征。
方法：
1.收集2004年～2006年冬季(11月至次年2月)因ALRI在北京儿童医院住院治疗的5岁以下患儿鼻咽吸出物333份，男230例，女103例，年龄为1月至58月。
2.同时采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)扩增技术和病毒分离方法对标本进行HBoV检测。病毒分离采用HEp-2和Vero两种细胞。
3.将获得的HBoV NS1基因PCR阳性扩增产物进行序列测定，采用Sequencher、BioEdit和MEGA生物软件对阳性标本与GeneBank中的参考株HBoV st1和HBoV st2进行基因亲缘性关系分析和序列比对分析。
结果：
1.333份标本中采用PCR方法检测到16份HBoV阳性扩增产物，阳性率为4.80％(16/333)，其中3例合并RSV感染，混合感染率为18.75％(3/16)。
2.病毒分离情况：采用HEp-2和Vero两种细胞进行病毒分离未得到HBoV阳性毒株。
3.基因序列测定和比较分析：基因亲缘性关系分析显示，本实验中获得的HBoVNS1基因扩增的DNA片段在基因亲缘性关系树上与HBoV参考株st1、st2形成一簇，而与HBoV参考株st1相比，本研究的毒株与HBoV参考株st2的核苷酸同源性水平更高，为98.5～100％，因此本研究的毒株与HBoV参考株st2更为接近。序列比较分析显示，本实验中获得的HBoV NS1基因扩增的DNA片段与HBoV参考株st1、st2的核苷酸同源性分别为98.1～98.5％、98.5～100％，与HBoV参考株st1、 st2的氨基酸同源性均为98.6～100％。
4.HBoV阳性患儿的中位年龄为8月(年龄为3月至57月，平均年龄为17月)。年龄在3岁以下的14例，占87.5％(14/16)，1岁以下的9例，占56.25％(9/16)，其中年龄在6个月以下的7例，占43.75％(7/16)。该16例HBoV阳性患儿临床均有咳嗽及胸片异常，发热及喘息表现占60％以上。临床诊断为肺炎10例(62.5％，10/16)，毛细支气管炎2例(12.5％，2/16)，急性支气管炎2例(12.5％，2/16)，哮喘合并肺炎1例(6.25％，1/16)，哮喘合并支气管炎1例(6.25％，1/16)。临床诊断为重症ALRI 3例(18.75％，3/16)，轻症ALRI 13例(81.25％，13/16)。1例HBoV阳性患儿死亡。
结论：
2004年～2006年冬季北京儿童医院ALRI住院患儿HBoV感染的毒株与HBoV参考株st2更为接近。