萝卜硫素对胃癌细胞生物学行为的影响及其机制研究

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目的:胃癌是人类高发恶性肿瘤,其发病率一直呈上升趋势。2018年,中国胃癌的发病例数和死亡例数都居于我国恶性肿瘤的第二位。因此对胃癌治疗方法的深入研究尤显重要。萝卜硫素(Sulforaphane,SFN)是一种异硫氰酸酯,主要来源于西兰花,抱子甘蓝和卷心菜等十字花科蔬菜,可以调节生物体内的多条信号通路。大量的研究已证实,SFN在乳腺癌、结肠癌、前列腺癌、膀胱癌以及胃癌等多种恶性肿瘤均具有抗肿瘤作用,但是SFN抗癌活性的潜在机制仍未完全了解。本研究旨在探索SFN对胃癌细胞BGC-823和MGC-803周期和凋亡的影响,并探讨其可能分子机制。方法:使用不同浓度SFN作用于BGC-823和MGC-803细胞系,分别计算24、48、72h的抑制率,SPSS 23.0 Probit法计算药物的IC50值,MTT法检测SFN对细胞活力的影响;应用细胞克隆形成实验检测SFN对细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测SFN对细胞周期的影响;Hoechst 33258染色法和流式细胞术检测SFN对细胞凋亡的影响;Western blot法分析SFN对CDK2、P53、P21、Bax和Cleaved-caspase-3等细胞周期相关蛋白及凋亡相关蛋白表达水平的影响。结果:与空白对照组相比,SFN暴露对BGC-823和MGC-803细胞系的活性和克隆形成能力产生损伤:SFN暴露组细胞活性下降、克隆数目明显降低。此外,SFN通过将细胞周期停在S期并以剂量依赖性方式增强BGC-823和MGC-803细胞凋亡,从而显著抑制细胞增殖。Western blot结果显示,使用SFN处理BGC-823和MGC-803细胞,导致与细胞周期S期相关的P53,P21的表达显著增加而CDK2的表达降低,参与细胞凋亡的Bax和Cleaved-caspase-3蛋白表达呈剂量依赖性显着增加。结论:SFN可降低胃癌细胞的活性、抑制其增殖,其机制可能通过激活胃癌细胞中P53介导的P21-CDK2轴诱导S期细胞周期阻滞,通过P53介导的线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡。
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