一株丝状真菌胞外中性纤维素酶系的分离纯化与酶功能的研究

来源 :山东大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mikoo999
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
纤维素生物质是自然界中存在最广泛的有机物质,通过其生物合成和生物降解来保持生物圈的碳循环。近年来,由于化石能源供应不稳定,环境与生态平衡遭到破坏,以及全球气候的急剧变化,使生物质资源转化及纤维素酶新工艺开发具有了重要的战略意义。在纤维素生物质转化及纤维素酶应用的过程中,丝状真菌由于具有高效的胞外蛋白质分泌系统,产纤维素酶量大、酶活力高,发挥着重要作用。近十年来,丝状真菌所产中性纤维素酶由于高效优质的处理工艺和较小的环境压力,在纺织工业中得到了广泛应用。但是,目前国内关于该类菌株的研究工作很少,开发具有知识产权的高效中性纤维素酶具有重要意义。 本实验室从秸秆青贮饲料中筛选到一株丝状真菌,该菌株产胞外纤维素酶为中性酶,最适pH值在6.5左右,在pH值8.0-10.0范围内能够保持60%-50%的酶活力,经鉴定为黑葡萄穗霉属(Stachybotrys)一个新种,命名为Stachybotrys sp.S05。其胞外纤维素酶表达受纤维素底物、麸皮、玉米芯、Ca2+诱导,而以葡萄糖等还原性糖作为碳源时本底表达水平低;通过液体发酵条件优化,其最适产酶条件添加麸皮4.0%、玉米芯2.5%,在该条件下细胞外纤维素酶系总CMCase酶活达到2.04IU/mL,最适反应温度50℃。同时,Stachybotrys sp.S05胞外滤纸酶和木聚糖酶均为中性酶,在pH值6.5时二者活力分别达到10.0IU/mL和12.0IU/mL。通过Sephadex G25、DEAE-Sepharose Fast Flow、Bio gel P100、HPLC等方法,对Stachybotrys sp.S05胞外内切酶系进行了分离纯化,得到内切酶组分EG1,其分子量分别约为40.0kDa;EGI为主要内切酶活组分,其最适pH值在6.0左右,最适温度50℃,室温下酶活力稳定。利用MALDI-TOF MS鉴定了EGI肽序列特征,并对Stachybotrys属内切酶序列功能进行了生物信息学分析。 本论文开展的Stachybotrys sp.S05研究工作,为该菌株中性纤维素酶在纺织工业应用的研究提供了理论依据。
其他文献
以受体龙粳4及玉米DNA导入龙粳4后产生的变异后代为研究对象,对变异后代中、后期的光合特性进行分析,比较外源DNA导入水稻后,对水稻光合特性的影响,同时对其DNA、同工酶、形态性
  在了解我国老年住宅发展现状及问题的基础上,本文提出适合我国国情的老年住宅供给的理想架构,并根据美国、日本在老年住宅上的成果经验分别对政府、开发企业、公民个人以及
  本文通过对"环京津贫困带"地区贫困状况现状的调研,以及数据的分析,归纳总结了"环京津贫困带"地区出现贫困状况的原因,并通过原因的分析,进而提出相应的措施与方法。为"环京
随着经济发展到一定阶段,长期失业问题已经成为了国际社会关注的主要问题之一,各国都将其视为衡量政府工作的重要内容,我国则视就业为民生之本,对失业问题以及失业群体更是予以了
  本文依托针对社会保险补贴政策实际运行情况的调查数据,以及对政策享受个体和经办人员的深度访谈资料,借此试图对北京市失业人员社会保险补贴政策的运行情况展开一次较为系
  北京市随之人口老龄化,预期寿命增长趋势,老年的卫生健康服务十分重要,慢病对人口老化影响日益加大,认知障碍是一种高发但可以防治的临床综合症。本文就此进行科普,并对自我脑
正如美国前财政部长Robert Rubin所言:“关于市场,唯一能确定的就是不确定性。”对于大部分投资者而言,宏观经济的波动是难以把握的。在经历了2008年的金融危机之后,经济 As
  孩子是祖国的未来,是我们民族的希望。而农村留守儿童作为一个特殊的群体,是我国社会转型、城乡发展不平衡的产物,在成长过程中,学习、心理和生活等方面等出现了不同程度的问
  高校是国家培养高级专门人才的重要阵地,也是国家科技创新的中心。在科研工作者日益无视科技道德的当下,高校有条件也有义务应该通过多种形式的手段来加强对科研工作者的科
具有薄弱层的结构在地震中极易发生层间失效,近场地震的速度脉冲等效应更加剧了这种局部破坏的可能性,严重制约结构整体抗震性能的发挥。摇摆结构作为一种新型的结构体系已经