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本文通过对新疆雪莲组培快繁过程中不定芽发生、增殖、复壮和生根等多种影响因子的研究,建立了稳定、重复性好的新疆雪莲植株再生体系,并首次实现了新疆雪莲的瓶外生根,简化了组培快繁的程序,缩短了快繁周期,提高了试管苗移栽成活率,为新疆雪莲的大规模人工种植提供优良种苗奠定了技术基础。
建立了稳定、重复性好的新疆雪莲高频不定芽再生体系。研究了激素种类和配比、外植体类型、培养条件对新疆雪莲再生时间和再生频率的影响。结果表明:以新疆雪莲25d苗龄无菌苗的不同部位为外植体,在MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+2,4-D0.1mg/L上进行初代培养,30d后转接到MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D0.01mg/L上继续培养15~20d,培养温度25±1℃,在45d的培养周期内均可诱导出大量不定芽丛。其中以真叶为外植体芽诱导率最高,达到66%,且每个外植体上平均出芽数达到6.1。
研究了不同环境因子对新疆雪莲增殖和复壮的影响,确定了最佳增殖及复壮条件为:在MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L上进行增殖扩繁,接种密度为12~16芽/瓶,每继代2~3次,转移到MS+多效唑0.05mg/L释放激素复壮一次。控制温度在20±1℃,平均增殖倍数可达到5.2,且试管苗健壮。
首次实现了新疆雪莲的瓶外生根。与瓶内生根的试管苗进行了对比发现:新疆雪莲瓶外生根率略低于瓶内生根,但是移栽成活率明显高于后者。瓶苗质量是瓶外生根能否成功的关键,最佳的瓶外生根条件为:将生长健壮的试管苗敞口炼苗3d后取出,洗净底部培养基,在含有1mg/LNAA,1g/L多菌灵的溶液中浸泡30min,扦插入灭菌过的蛭石中,蛭石与1/2MS大量元素溶液体积比在2:1至3:1之间。控制温度在20±1℃,光强35001x,经过30d,瓶外生根率达到80%左右。再生植株移栽入花卉营养土中在温室中进行培养,遮阴、保湿,成活率100%。