【摘 要】
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细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和自然杀伤细胞(NK)在抗病毒及细胞内细菌感染、器官移植排斥和抗肿瘤应答中具有重要作用。直接释放细胞毒性颗粒是CTL和NK细胞杀伤靶细胞的重要途径
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细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和自然杀伤细胞(NK)在抗病毒及细胞内细菌感染、器官移植排斥和抗肿瘤应答中具有重要作用。直接释放细胞毒性颗粒是CTL和NK细胞杀伤靶细胞的重要途径。细胞毒性颗粒的内含物主要包括穿孔素、颗粒素以及颗粒酶蛋白家族。颗粒酶属于丝氨酸蛋白酶家族成员，是CTL和NK细胞发挥细胞毒作用的主要效应分子。到目前为止，在人类发现了5种颗粒酶。人们对颗粒酶A和B研究的较多，对包括颗粒酶M在内的其他几种颗粒酶的功能以及作用机理知之甚少。
颗粒酶M与其他颗粒酶氨基酸同源性不到40％，具有独特的的基因定位、酶活性及特定的表达谱。我们采用酵母表达系统表达纯化了活性和点突变失活的颗粒酶M，用阳离子脂质蛋白转染试剂Pro-Ject将颗粒酶M转导入肿瘤细胞系，发现颗粒酶M介导了快速的靶细胞死亡。类似于颗粒酶B，磷脂酰丝氨酸外翻、染色体凝集、核形态变化及DNA双链断裂为颗粒酶M介导靶细胞死亡的主要特征。颗粒酶M介导的靶细胞死亡依赖于caspase的激活，caspase抑制剂Z-VAD能够阻断颗粒酶M介导的靶细胞死亡。颗粒酶M直接切割ICAD释放核酶CAD的活性，并切割DNA修复酶PARP加速了靶细胞凋亡进程。线粒体途径参与了颗粒酶M诱导的细胞凋亡，颗粒酶M切割Bid诱导线粒体cyt c释放。抗凋亡蛋白Mcl-1是颗粒酶M的底物，其在颗粒酶M诱导的细胞凋亡中的作用有待进一步深入研究。我们对颗粒酶M介导细胞死亡机理的研究加深了人们对细胞毒性淋巴细胞杀伤肿瘤细胞机制的认识和理解。
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