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肾细胞癌(RCC)是最常见的肾癌,在RCC中透明细胞组织学是最普遍的,占80-90%的病例。尽管缺乏RCC筛查,大多数患者表现为早期肾细胞癌并且许多可以治愈肾脏切除术，尽管没有证据表明转移在术前就已经发生然而20-30%的患者进行了手术会复发。多数具有临床症状的患者往往伴随着肿瘤的转移，预后很差。传统的化疗，激素疗法或者放疗对于恶性程度高的肾细胞癌并没有有效的控制。然而，基于肾细胞癌的分子水平，新的治疗策略不同程度上显示一定的临床治疗效果。查阅肾细胞癌的相关文献显示，与肿瘤相关的PI3K/AKT/mTOR信号通路在肾细胞癌中异常表达，可能与肾细胞的发生发展存在密切的联系，同时体外研究显示，mTOR抑制剂可以明显的引起肾细胞细胞发生凋亡，显示出良好的肿瘤抑制作用。我们研究结果显示，相对于癌旁组织，PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白p-AKT和p-p70S6K在肾细胞癌中明显高表达，提示PI3K/AKT/mTOR信号通路可以肾细胞癌治疗的一个分子层面上的靶点。NVP-BEZ235，一种新型的PI3K和mTOR的双重抑制剂，显示出良好的抑制作用。除了参与细胞增殖外，PI3K/AKT/mTOR信号还可以抑制细胞自体吞噬（Autophagy）的发生，而自噬和吞噬的发生往往对于化疗药物引起的细胞凋亡表现出一定的保护作用，联合应用NVP-BEZ235和自噬抑制剂可能可以明显的提高NVP-BEZ235引起的细胞凋亡。本课题在前期研究的基础上，通过体外培养肾细胞癌786-0细胞系，探讨NVP-BEZ235对于肾细胞癌786-0细胞存活率的影响，以及NVP-BEZ235引起的自噬对于NVP-BEZ235引起的细胞存活率的改变的影响。目的:探讨新型磷脂酰肌醇3-激酶/哺乳动物雷帕霉素（PI3K/mTOR）抑制剂NVP-BEZ235对肾细胞癌786-0细胞增殖、自噬和凋亡的影响。寻找新的治疗肾细胞癌的策略。方法:通过收集临床肾细胞组织标本和体外培养肾细胞癌786-0细胞，利用Western Blotting检测肾细胞组织标本中PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白表达的变化。利用MTT方法检测PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235对肾细胞癌786-0细胞增殖的影响，同时利用不同阶段的自噬抑制剂探讨抑制自噬对于NVP-BEZ235引起的凋亡的影响。NVP-BEZ235对肾细胞癌786-0细胞增殖、自噬和凋亡的影响结果:相对于癌旁肾组织，肾细胞癌组织中PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白p-AKT和p-p70S6K表达水平升高。PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235在体外可以明显的抑制肾细胞癌786-0细胞增殖，同时可以引起凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3以及PARP表达水平的升高。在引起786-0细胞发生凋亡的同时，NVP-BEZ235还引起自噬相关蛋白LC3以及p62表达水平的变化。利用自噬不同阶段抑制剂3-MA，氯喹以及氯化铵可以明显增高NVP-BEZ235引起的786-0的增殖抑制和凋亡。结论: PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白在肾细胞癌组织中表达水平升高；PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235可以明显的抑制肾细胞786-0细胞增殖和促进凋亡的发生；自噬抑制剂可以明显提高NVP-BEZ235引起的786-0的增殖抑制和凋亡。