白屈菜红碱的抑菌活性及其抑菌机理研究

• 作 者: 邱东旭
• 出 处: 东北林业大学
• 发表日期: 2018年01期
• 关键词: 白屈菜红碱 抑菌活性 抑菌机理

白屈菜为罂粟科白屈菜属植物,是一种有着很高开发前景的新型药用植物。白屈菜中的主要活性成分为白屈菜红碱,白屈菜红碱是一种苯并菲啶型生物碱,具有抗炎、抗真菌等生物学活性。本文研究的是白屈菜红碱的抑菌活性及抑菌机理。分离筛选三种真菌,经18SrDNA鉴定分别为稻黑孢菌属、赤霉菌属和球毛壳菌属。将白屈菜红碱加入PDA培养基中制成浓度分别为5 X 10-3 mg/mL,1.0×10-2mg/mL,1.5×10-2mg/mL,2.0×10-2mg/mL的带药培养基,利用分离得到的稻黑孢菌和赤霉菌进行白屈菜红碱抑菌活性实验,结果显示随着白屈菜红碱浓度增加,其抑菌效果越明显,抑菌率越高,其中当浓度为2.0×10-2mg/mL,白屈菜红碱对稻黑孢菌的抑菌率高达95%,对赤霉菌的抑菌率为92%。本文从以下三个方面研究白屈菜红碱的抑菌机理:(1)白屈菜红碱对真菌细胞壁细胞膜的影响。(2)白屈菜红碱对孢子内ROS含量的影响。(3)白屈菜红碱对DNA的影响。根据光学显微镜、扫描电镜的结果显示白屈菜红碱可以使稻黑孢菌菌丝产生褶皱,在透射电镜下可以观察到菌丝被白屈菜红碱破坏产生的孔洞;测试水稻黑孢菌细胞壁的通透性,在280 nm处水稻黑孢菌细胞外液的吸光值明显增加可以确定白屈菜红碱对稻黑孢菌的细胞壁有一定的破坏;之后测试了在带药培养基中孢子的萌发率,结果显示在白屈菜红碱的作用下孢子的萌发率明显下降;经过荧光染料H2DCF-DA染色后,在荧光显微镜下观察可以明显看出白屈菜红碱可以使孢子内部积累ROS;最后通过琼脂糖凝胶电泳实验结果可以看出白屈菜红碱可以使水稻黑孢菌DNA片段化。