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第一部分、Hsp27促进肝细胞癌侵袭转移的分子机制研究 目的：肝细胞癌是一种机制复杂的恶性肿瘤，其特征为进展迅速、预后不良。引起肝癌病人死亡的最主要原因是肿瘤的转移，然而肝癌转移的分子机制尚不明确。本研究主要探讨热休克蛋白27（heat shock protein27,Hsp27）促进肝癌侵袭转移的作用及其相关分子机制。 方法：荧光定量PCR和western blotting检测肝癌组织及肝癌细胞系中Hsp27 mRNA和蛋白表达水平。对包含167例肝癌样本的组织芯片进行免疫组化染色，分析Hsp27表达水平与肝癌患者预后的关系。在Hsp27表达较低的SK-Hep1和SMMC7721细胞系中采用慢病毒感染过表达Hsp27，并在Hsp27表达较高的MHCC97H和HCCLM3细胞系中采用shRNA慢病毒感染干扰其表达，通过western blotting检测过表达或干扰效率。Transwell小室法检测肝癌细胞的运动侵袭能力，同时建立裸鼠尾静脉转移模型检测Hsp27对肝癌转移的影响。运用磷酸化激酶芯片检测Hsp27激活的信号通路，同时采用PCR-array筛选Hsp27参与调控的下游转移相关效应分子，并初步解析上下游分子间的调控网络。最后，对Hsp27分子靶向药物OGX-427在肝癌转移中的作用进行初步研究。 结果：Hsp27在肝癌组织中的表达水平显著高于对应癌旁组织。Keplan-Meier分析提示Hsp27表达水平可有效预测 HCC患者的总体生存和术后复发。过表达Hsp27明显促进SK-Hep1和SMMC7721细胞的迁移和侵袭能力，并在体内实验中促进肝癌细胞的肺转移；相反，敲除Hsp27能够在体内和体外实验中抑制细胞迁移侵袭能力。为了明确Hsp27促进HCC转移机制，运用磷酸化激酶芯片检测其激活的相关信号通路。结果显示Hsp27过表达上调Akt磷酸化水平，并能通过p-Akt促进细胞运动侵袭能力的增加。此外，Hsp27联合p-Akt对肝癌患者的预后有较好的预测价值。转移相关PCR-array检测结果显示ITGA7和MMP2可能为Hsp27和p-Akt的下游效应分子，其功能还需进一步的验证。最后，本研究还发现Hsp27的靶向药物OGX-427可有效降低Hsp27的表达并抑制肝癌细胞的迁移侵袭能力。 结论：Hsp27在肝癌组织中表达上调并且可以作为肝癌患者预后的预测指标。Hsp27可能通过Akt/ ITGA7/ MMP2通路发挥其促进肝癌细胞转移的功能。Hsp27的靶向药物OGX-427能有效下调Hsp27的表达，同时显著抑制肝癌细胞的运动侵袭能力。 第二部分、LRG1在肝细胞癌侵袭转移中的抑制作用 目的：探索新的转移相关基因LRG1在HCC中的作用。 方法：荧光定量PCR检测36对肝癌组织及对应癌旁组织中LRG1的mRNA表达水平。免疫组化染色分析LRG1在51对肝癌组织芯片中的表达情况及临床意义。通过LRG1过表达或siRNA干扰其表达，检测LRG1对肝癌细胞侵袭转移的作用。 结果：荧光定量PCR及免疫组化染色结果显示LRG1在肝癌组织中表达量显著下调。体外细胞实验显示LRG1对细胞增殖能力无影响，但高表达可以抑制HCC细胞的迁移侵袭能力，相反干扰LRG1促进其运动侵袭能力。人源性的重组LRG1处理细胞后，同样可以抑制肝癌细胞的迁移侵袭。 结论：LRG1是HCC进展过程中的新型的抑制因子。