论文部分内容阅读
选用脱色率和蛋白质损失率为指标,研究活性炭、羧甲基淀粉脱除猪血红蛋白酶解液色泽的优化工艺条件；以珠蛋白水解度为指标,对胃蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解珠蛋白条件进行优化；在酶解优化条件下,通过不同水解阶段的珠蛋白水解产物对ACE活性抑制率的测定,筛选具有较高ACE抑制活性的珠蛋白源生物活性肽酶解技术参数；经Sephadex G-25层析分离后获得珠蛋白源ACE抑制肽。
1.活性炭对猪血红蛋白酶解液的脱色研究。通过正交试验,比较研究活性炭用量、pH值、温度和时间对活性炭脱除猪血红蛋白酶解液色泽效果的影响。结果表明：活性炭的用量为1％,pH值为4.0,温度为80℃,时间为40min时为活性炭脱除猪血红蛋白色泽的最佳工艺参数,其酶解液脱色率为87.68％,蛋白质损失率为37.83％。
2.羧甲基淀粉对猪血红蛋白酶解液的脱色研究。根据单因素试验确定时间为20min,再通过正交试验,比较研究羧甲基淀粉的用量、pH值和温度对猪血红蛋白酶解液脱色效果的影响。结果表明：在羧甲基淀粉的用量为0.2％,pH值为4.0、温度为50℃的条件下脱色吸附20min,为羧甲基淀粉处理猪血红蛋白最佳脱色工艺参数,其酶解液脱色率为84.90％,蛋白质损失率为12.29％。
3.用三因素二次旋转试验与正交试验分别优化胃蛋白酶、木瓜蛋白酶水解珠蛋白的水解条件,测定各酶优化水解方式下不同水解阶段的水解产物对ACE抑制活性的影响。结果表明：在胃蛋白酶水解珠蛋白的酶量0.3％,初始pH值2.6,蛋白浓度0.7％,温度37℃,时间4h时,水解产物对ACE抑制活性最大,抑制率为93.2％；在木瓜蛋白酶水解珠蛋白的酶量为0.7％,初始pH值为5.2,蛋白浓度为0.5％,温度为56℃,3h时,水解产物对ACE的最大抑制率为90.49％。
4.选择具有分子筛作用的Sephadex G-25为层析材料对具有较高ACE抑制活性的珠蛋白源活性肽进行分离。在洗脱流速为0.5mL/min时,选用三种不同离子强度的磷酸盐缓冲液进行洗脱分离。结果表明：在0.03mol/L离子强度的pH8.3的磷酸盐缓冲液洗脱下,Sephadex G-25可从水解物中分离得到4个组分峰,其第4组分峰对ACE的抑制活性最大,抑制率为93.3％。