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肌肉组织中的脂肪含量和组成是影响畜禽肉品质的重要因素。肌肉中90%以上的脂肪酸是长链脂肪酸,主要依赖细胞外跨膜转运过程进行摄取。参与脂肪酸跨膜转运的载体蛋白主要包括脂肪酸转运蛋白—1(FATP—1)、膜脂肪酸结合蛋白(mFABP)、脂肪酸转位酶(FAT/CD36)和小窝蛋白—1(caveolin—1)等。为研究上述转运载体对长链脂肪酸的选择性转运,本研究以100日龄快大白公鸡和乌骨公鸡的胸肌和腿肌为材料,采用气相色谱—质谱法和荧光定量PCR法分别检测了各样品中长链脂肪酸的组成及上述四种载体蛋白的mRNA表达水平,并分析了二者之间的相关性。同时构建了鸡FAT/CD36和caveolin—1的过表达CHO细胞模型。用等摩尔生理浓度(0.5mM)的棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和花生四烯酸处理细胞,验证鸡FAT/CD36及caveolin—1对不同类型长链脂肪酸的转运选择性。研究表明:(1)棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和花生四烯酸是鸡骨骼肌中的主要脂肪酸。两品种间骨骼肌脂肪酸组成差异不显著,但快大白公鸡骨骼肌中饱和脂肪酸的相对含量高于乌骨公鸡。不同部位间骨骼肌脂肪酸组成差异较显著,腿肌与胸肌相比,脂肪酸的种类较多,而且亚油酸的相对含量较高,棕榈酸的相对含量较低。(2)相关性分析结果显示FATP—1与亚油酸呈负相关;mFABP与花生四烯酸有正相关关系;FAT/CD36与亚油酸呈正相关,与棕榈酸呈负相关;caveolin—1对任何脂肪酸都没有显著相关性。(3)细胞模型实验结果表明,过表达鸡FAT/CD36及caveolin—1均能够增加细胞对总脂肪酸的摄取,但对不同类型脂肪酸具有一定的选择性,其中鸡FAT/CD36能有效降低棕榈酸的相对吸收量,同时对亚油酸和花生四烯酸具有转运偏好性。
本文根据不同品种和部位鸡骨骼肌脂肪酸组成和脂肪酸转运膜蛋白基因表达差异的结果,首次提出并论证了“骨骼肌脂肪酸转运膜蛋白对长链脂肪酸的转运存在选择性”的假设,为深入认识脂肪酸跨膜转运的分子机制、寻找改善肉品脂肪酸含量和组成的新途径提供理论和实验依据。