左旋多巴对大鼠中脑小胶质细胞的影响

• 作 者: 刘丽金
• 机 构: 福建医科大学
• 出 处: 福建医科大学
• 发表日期: 2014年01期
• 关键词: 帕金森病 6-羟多巴胺 L-Dopa 小胶质细胞 TNF-α 炎症反应

帕金森病(Parkinson,s disease，PD)是一种常见的神经系统退行性疾病，以中脑黑质致密部多巴胺（DA）能神经元变性坏死和出现Lewy小体为主要病理特点。左旋多巴（L-Dopa）是PD治疗上的主要药物之一，目前关于L-Dopa的毒性存在争议，长期的动物体内研究与临床研究结论不一。6-OHDA制作的PD模型能模拟PD的病理过程，模型中可以观察到小胶质细胞的激活及炎症因子TNF-α等增加，最终介导DA能神经元的缺失。本实验以6-OHDA的PD模型为对照，观察L-Dopa的脑内直接注射以及灌胃给药能否产生类似6-OHDA的毒性，引起小胶质细胞的增生激活并介导DA能神经元的损伤，初步探讨L-Dopa可能的毒性，为临床L-Dopa的安全合理用药提供依据。1、方法：（1）取SD大鼠，随机分成实验组与对照组，实验组大鼠左侧纹状体内分别注射6-OHDA(5ug/uL)、不同剂量L-Dopa（50ug/uL、5ug/uL、1ug/uL），对照组注射等量生理盐水；（2）取SD大鼠，随机分成实验组与对照组，实验组大鼠灌胃分别给不同剂量L-Dopa（200mg/kg.d、100mg/kg.d、10mg/kg.d），对照组注射等量生理盐水；（3）术后观察各组经阿朴吗啡诱导后大鼠旋转行为的改变；（4）术后4周取实验组和对照组脑组织行免疫组织化学染色，观察黑质DA能神经元数量变化；行免疫荧光技术染色,观察大鼠中脑黑质致密部中的小胶质细胞激活情况及TNF-α水平的改变；2、结果：（1）与对照组相比，术后4周6-OHDA诱导的PD大鼠模型可观察到脑黑质中小胶质细胞的激活（P<0.001）、TNF-α水平的增高（P<0.001）及DA能神经元的减少（P<0.001）；（2）与对照组相比，术后4周直接脑内注射高剂量L-Dopa的正常大鼠可观察到脑黑质中小胶质细胞的激活（P<0.05）、TNF-α水平的增高（P<0.05）及DA能神经元的减少（P<0.05）；（3）与对照组相比，术后4周正常大鼠直接脑内注射中、低剂量L-Dopa、灌胃给各剂量L-Dopa未发现脑黑质中小胶质细胞的激活（P>0.05）、TNF-α水平的增高（P>0.05）及DA能神经元的减少（P>0.05）。3、结论：（1）健康大鼠脑内直接注射高浓度L-Dopa可产生与6-OHDA相似的神经毒性，即引起小胶质细胞的激活及DA能神经元的受损，但一般口服剂量L-Dopa对健康大鼠没有发现神经毒性。（2）不能排除在脑内已有严重病理变化的情况下，口服大剂量L-Dopa对DA能神经元产生毒性的可能性。