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目的：探讨STAT3靶向特异性siRNA(STAT3-siRNA)真核表达及其对人肝癌SMMC7721细胞凋亡的影响和分子机制,为干扰RNA (RNAi)靶向治疗肝癌提供新的实验依据。方法：1：设计三条STAT3-siRNA(STAT3-siRNA1、STAT3-siRNA2和STAT3-siRNA3)并构建相应的表达质粒,进行真核表达以沉默SMMC7721细胞中STAT3基因。激光共聚焦显微镜观察经转染STAT3一siRNA表达质粒的人肝癌SMMC7721的细胞器形态变化。2:Western blot检测三条STAT3-siRNA的真核表达及其对SMMC7721细胞内STAT3蛋白表达水平的影响,筛选其中最有效抑制STAT3蛋白表达的STAT3-siRNA表达质粒。3：PI单染流式细胞术检测STAT3-siRNA真核表达对SMMC7721细胞凋亡的影响。4：透射电镜观察经STAT3-siRNA表达质粒转染后SMMC7721细胞的形态学改变。5:RT-PCR半定量检测经转染STAT3-siRNA表达质粒后SMMC7721细胞内bc1-2和survivin基因表达水平的变化。结果：1:STAT3-siRNA真核表达质粒转染SMMC7721细胞48h后,激光共聚焦显微镜观察发现,表达绿色荧光蛋白的SMMC7721细胞占细胞总数的67%。2：三条STAT3-siRNA真核表达质粒(STAT3-siRNA1、STAT3-siRNA2和STAT3-siRNA3)转染SMMC7721细胞48h后,Western blot分析STAT3蛋白表达结果显示：STAT3-1转染组细胞的STAT3蛋白表达明显下调,与对照组相比具有统计学意义(P<0.05),且较STAT3-2和STAT3-3转染组更低。3:STAT3-1转染SMMC7721细胞48h后,PI单染流式细胞术检测转染组出现明显的亚二倍体凋亡峰,细胞凋亡率为13.76%,与对照组相比具有统计学意义(P<0.05)。4:STAT3-siRNA真核表达质粒转染SMMC7721细胞48h后,透射电镜观察结果显示：转染组细胞呈典型的凋亡细胞形态,表现为线粒体大部分嵴和膜融合和消失,细胞质内有空泡变性,细胞核膜破损缺失,核质生成许多碎块散落在细胞质内。5:STAT3-siRNA真核表达质粒转染SMMC7721细胞48h后,RT-PCR半定量分析bc1-2和survivin mRNA表达结果显示：转染组细胞内bc1-2和survivin mRNA表达水平明显降低,与对照组相比具有统计学意义(P<0.01)。结论：STAT3-siRNA真核表达质粒转染SMMC7721细胞48 h后,能够显著下调细胞内STAT3蛋白的表达,诱导细胞凋亡,其分子机制与下调细胞内bc1-2和survivin的表达水平有关。