【摘 要】
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目的:克隆、表达和纯化人Endostatin并检测其活性;研究人Endostatin对新生血管和卵巢癌细胞的作用,初步探讨其作用机制;检测Endostatin和VEGF在上皮性卵巢组织中的表达及其与上皮
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目的:克隆、表达和纯化人Endostatin并检测其活性;研究人Endostatin对新生血管和卵巢癌细胞的作用,初步探讨其作用机制;检测Endostatin和VEGF在上皮性卵巢组织中的表达及其与上皮性卵巢癌患者临床分期、病理指标和预后的关系。方法:(1)采用RT-PCR方法从新鲜胎肝中扩增人Endsotatin的cDNA全序列,将其克隆入原核表达载体pET30a(+),IPTG诱导表达,利用亲和层析分离纯化,获得有活性的蛋白质;(2)应用鸡胚尿囊膜血管生成实验检测rhEndostatin对新生血管的作用;(3)应用细胞培养、MTT法等分析rhEndostatin联合化疗药物(CDDP)对卵巢癌细胞增殖的影响,并结合RT-PCR方法检测该过程对MMPs和TIMPs表达的影响,初步探讨rhEndostatin的作用机制;(4)应用RT-PCR和免疫组化方法检测Endostatin和VEGF在上皮性卵巢组织中的表达,探讨其与上皮性卵巢癌患者临床分期、病理及预后的关系。结论:rhEndostatin不仅可抑制血管内皮细胞的增殖还可有效抑制卵巢肿瘤细胞增殖。rhEdostatin可提高SKOV3细胞对CDDP的敏感性,二者联合应用可更有效地抑制SKOV3细胞的增殖,为临床开展综合治疗卵巢癌开辟一条新路。Endostatin的作用机制与其降低新生血管形成和调节MMPs的表达有关。
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