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BTB家族是类Kuppel锌指蛋白家族中的一种,其家族成员参与生物体许多重要过程。BTBD6(BTB domain containing6)基因是该家族成员之一,该基因定位于人类染色体14号长臂3区2带,由5个外显子和4个内含子组成。cDNA编码序列长度为1233bp,蛋白质的计算分子量为45.69kDa,一级结构由410个氨基酸残基组成,含有BTB、BACK、PHR三个结构域,但是其具体功能还有待阐明。在本研究组前期工作中,应用酵母双杂交技术,以P16INK4A作为诱饵蛋白筛查成人肝脏cDNA文库,鉴定出它可以与P16INK4A相互结合。为了明确BTBD6基因在细胞生物学行为中的真正作用,本研究通过构建pcDNA3.1-BTBD6真核表达载体,稳定转染人胚肾HEK293T细胞系,药物压力持续作用筛选BTBD6蛋白稳定表达的细胞克隆。对于稳定表达的克隆应用细胞生长曲线和细胞划痕实验检测BTBD6蛋白对细胞增殖能力和细胞运动能力的影响。结果成功构建pcDNA3.1-BTBD6真核表达载体,并且获得多个稳定表达目的蛋白的HEK293T细胞克隆。细胞生长曲线显示BTBD6转染后的细胞增殖能力有一定的增强;细胞划痕实验也显示目的基因转染后的细胞迁移能力明显强于未转染的细胞。通过本研究初步明确P16INK4A作用蛋白BTBD6在细胞增殖与迁移过程中发挥作用,为探讨其在肿瘤发生、发展和转移过程中的功能奠定基础。