内质网应激介导的细胞凋亡在不同周龄大鼠挤压综合征中致病差异及特点研究

来源 :锦州医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:qwfyhwl
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目的挤压综合征是地震后除直接外伤死亡外的第二大死亡原因。目前尚没有关于年龄与挤压综合征发病机制的相关研究,本研究将重点关注不同周龄大鼠挤压综合征的病理生理特点,及内质网应激介导的细胞凋亡在不同周龄大鼠挤压综合征中致病的作用及机制。方法不同周龄健康雄性wistar大鼠144只,其中幼年组、成年组和中老年组各48只,每组再随机均等分为对照组、12h组、72h组。以大鼠自身体重15倍的压力挤压其双下肢肌肉最丰富处16h造模,分别于解压后12h及72h麻醉处死动物,记录大鼠72h生存率,检测血清生化指标,ELISA检测血清IL-6、IL-10、TNF-α、HMGB1水平、血清及肾组织肌红蛋白(Mb)含量,对受压肌肉、肾、肺组织进行病理学评估,对受压肌肉组织及肾组织进行TUNEL染色观察凋亡,采用免疫组化检测大鼠肾及肌肉组织细胞凋亡和内质网应激蛋白表达情况。对照组不作处理,取材方法同模型组。结果解压后不同周龄大鼠72h生存率不同,中老年大鼠生存率最低(50%,8/16),成年组大鼠生存率为75%(12/16),幼年组大鼠生存率最高(93.75%,15/16)。各周龄模型组大鼠较对照组血清生化指标K~+、CK、BUN、Cr、ALT、AST、LDH、血清HMGB1、IL-6、IL-10、TNF-α、血清及肾组织肌红蛋白值均明显升高(P<0.05),不同周龄大鼠间存在差异,且不同处理组大鼠各项指标变化随周龄不同而不同,相比于幼年组及成年组大鼠,中老年大鼠多数指标变化更为明显。病理结果显示各年龄组大鼠肌肉、肾及肺脏出现不同程度损伤,其中中老年模型组大鼠肌肉、肾、及肺脏病理损伤最为严重。幼年组大鼠肾组织损伤程度低于成年组和中老年组。模型组大鼠肾及肌肉组织凋亡细胞比率、Caspase-3、Caspase-12及CHOP表达水平均明显高于对照组(P<0.01),且其表达变化随大鼠周龄不同而不同,中老年组大鼠表达水平最高。结论1、挤压综合征发生时,年龄作为一项独立危险因素,与疾病的发生发展及预后密切相关。不同周龄挤压综合征大鼠损伤程度、病理生理特点及预后均有所不同。2、挤压后,幼年组大鼠肾组织Mb含量及损伤程度低于成年组和中老年组。中老年组大鼠肾损伤最为显著。3、不同周龄大鼠挤压伤后内质网应激介导的肾小管上皮细胞凋亡程度不同。其中中老年组大鼠内质网应激介导的细胞凋亡最为显著,幼年组大鼠内质网应激介导的细胞凋亡低于成年组和中老年组。4、机体炎症反应及HMGB1表达水平可能参与激活内质网应激介导的细胞凋亡。5、本研究为针对不同年龄的挤压综合征个体化治疗提供了策略和实验依据。
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