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动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)是隐匿性强、渐进性强、危害性极大的常见病和多发病。针对动脉粥样硬化发生和发展的病理生理学关键环节，靶向调血脂和脂质过氧化的药物研究，虽然取得了一定的进展，但至今尚无以抗动脉粥样硬化的临床适应症上市的药物。因此，研究抗动脉粥样硬化药物具有重要意义。 血管内皮细胞功能障碍与动脉粥样硬化的发生和发展密切相关，血管内皮细胞乙酰胆碱靶标(the endothelial target for acetylcholine，ETA)介导的内皮依赖性舒血管反应是判断血管内皮细胞功能是否正常的公认的指标。本研究室在对ETA的药理学特征及其与动脉粥样硬化发生和发展之间的关系进行系统的研究中，首次发现在高血脂病理状态下，ETA功能受损及其低下的程度与AS的发生和发展密切相关，以激动剂改善受损的ETA的功能，可对抗AS的发生和发展；并在体外细胞学实验和体内高血脂诱发大鼠动脉粥样硬化模型上，对具有内皮依赖性舒血管活性的化合物初步筛选，发现了具有抗动脉粥样硬化作用的新化合物哌芳安他。本研究在此基础上使用高血脂诱发兔和鹌鹑动脉粥样硬化模型进一步评价新化合物哌芳安他抗动脉粥样硬化作用的药效学特征及其抗动脉粥样硬化作用的分子机制，旨在为抗动脉粥样硬化创新药物的研究打下坚实的基础。 一、靶向内皮细胞的新化合物哌芳安他抗动脉粥样硬化作用的研究 (一) 新化合物哌芳安他对高血脂诱发兔动脉粥样硬化的影响 给予兔高脂饮食12周，可见兔主动脉内膜下脂质沉积，导致粥样硬化斑块形犯向月民朴内皮细月匕的新博七合物眼芳安节匕执动林肠样砚化作用的花开究中文摘妥成。光镜下，兔冠状动脉内膜明显增厚，局部向管腔内突起，形成动脉瘤;内皮细胞间连接断裂，内膜表面出现破损:中膜平滑肌细胞极向排列紊乱，增生活跃。 在相同水平的高血脂状况下，新化合物呱芳安他1一sm叭g可明显减轻兔主动脉粥样硬化病变程度。光镜下，兔冠状动脉内膜光滑、完整，内皮细胞相互之间联结紧密。给予呱芳安他lm留kg治疗，兔冠状动脉中膜增厚，平滑肌细胞核增大，处于增生前期。给予呱芳安他sm叭g治疗，中膜平滑肌细胞大小和形态正常，排列整齐，无迁移和增生迹象，与正常饮食组相同。 (二)新化合物呱芳安他对高血脂诱发鹤鹑动脉粥样硬化的影响 给予鹤鹑高脂饮食14周，高脂模型组鹤鹑主动脉内膜表面形成脂质条纹，并相互融合成片;病变部位以主动脉胸腹部为主，向主动脉根部和腹主动脉延伸。光镜下可见内皮细胞脱落，未脱落处内皮细胞间连接疏松;内膜明显增厚，局部向管腔内凸起。扫描电镜下，鹤鹑内膜表面有单核细胞粘附，内皮细胞变形，呈叶片状浮起，细胞间隙增大。表明给予鹤鹑高脂饮食可诱发高血脂导致动脉粥样硬化形成。 在相同水平的高血脂状况下，化合物呱芳安他3、6和9m叭g组，均能减轻鹤鹑主动脉粥样硬化病变程度，与高脂模型组比有显著性差异(动脉粥样硬化病变分级，P<0.01)，总的观察结果呈现剂量依赖性。光镜观察结果显示，呱芳安他3、6和gmg/kg处理组鹤鹑头臂动脉内膜下脂质沉积减少，内膜病变明显减轻(P<0.01)，总结果也呈剂量依赖性。扫描电镜下，给予呱芳安他3m叭g治疗组与高脂模型组相比，血管内膜表面单核细胞的粘附减少;给予呱芳安他6和gm留kg组鹤鹑，血管内皮细胞形态正常，细胞间连接紧密，与正常饮食组相似。 相同实验条件下，给予辛伐他汀sm叭g治疗后，其主动脉粥样硬化大体病变程度与高脂饮食组比较明显减轻(P<0 .01)。光镜下，给予辛伐他汀处理组平均动脉硬化病变程度与高脂模型对照组比没有显著区别。扫描电镜下，给予辛伐他汀smg瓜g处理组与给予呱芳安他3mg瓜g处理组相类似。 (三)新化合物呱芳安他抗高血脂诱发动脉粥样硬化的特征 呱芳安他在兔实验模型上显示出对血浆总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇呈现“一过性”抑制作用，实验后期有升高血浆高密度脂蛋白的趋势，理论上均有利于呱芳安他发挥抗动脉粥样硬化作用。但在鹤鹑实验模型上，辛伐他汀sm留kg显 军事医学料学晚硕士学位论文·4-祀向血管内皮细胞的新下七合物弓医芳安洲匕执动脉知样勾巨化作用的研究中文摘奏著降低血浆TC，而相同实验条件下，呱芳安他对血脂水平无影响。 高脂饮食饲养可致兔和鹤鹑肝组织脂质沉积、变性、坏死，显著降低兔肝组织中SOD和GSH一Px的活性。高脂饮食同时给予新化合物呱芳安他可减轻高脂饮食引起的兔和鹤鹑肝脏的病理改变，显著抑制高脂饮食引起的肝组织中胆固醇的升高和GSH一Px活性的降低。并在大样本量的鹤鹑模型上呈现出剂量依赖性。提示呱芳安他对肝脏具有保护作用。 以上结果表明，新化合物呱芳安他不影响血脂水平，却能延缓高脂饮食诱导的兔和鹤鹑动脉粥样硬化及高脂血症脂肪肝的形成。二、新化合物呱芳安他体外抗氧化作用的研究 在体外c了+诱导LDL氧化反应体系中，以对LDL氧化产物丙二醛生成的抑制率为指标，研究新化合物呱芳安他抗低密度脂蛋?