阿苯达唑在治疗肝泡型包虫病患者中对Th1、Th2细胞的作用机制研究

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目的:研究阿苯达唑片剂(Albendazole,ABZ)治疗对肝泡型包虫病(alveolarechinococcosis,AE)患者和多房棘球蚴(Echinococcus multilocularis, E.m)感染BALB/c小鼠Th1和Th2免疫细胞应答模式,Th1/Th2免疫应答平衡的影响,观察ABZ治疗AE的免疫水平的疗效。方法:选用6~7周龄BALB/c小鼠共32只,随机分为E.m感染组(E.m+Sodium salt of Caboxy Methyl Cellulose,E.m+CMC,N=12)、E.m感染阿苯达唑治疗组(E.m+ABZ+CMC,N=12)和健康对照组(controls,C+CMC,N=8),羧甲基纤维素钠(CMC)溶剂成分,使ABZ研碎粉末溶解水中起悬浮稳定作用。通过腹腔注射法建立E.m感染小鼠模型。E.m+ABZ+CMC治疗组给予灌胃ABZ+CMC治疗(100ul/d,3mg,35days),其余两组灌等量CMC液体。回顾性分析2012年12月至2014年3月新疆医科大学第一附属医院收治的受试者58例,其中AE患者服用ABZ16例,年龄(45.3±14.5)岁,纳入AE+ABZ组;AE首治患者14例,年龄(34.7±8.1)岁,纳入AE组;健康志愿者28例,作为空白对照,年龄(32.9±10.6)岁,纳入Control组。AE+ABZ组患者服用ABZ片的量是10mg(kg/d),服用ABZ的时间为(2.5±2.3)年。所有受试者在入组后第2天早晨空腹抽取外周血。实时荧光定量PCR检测各相关因子基因的的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各相关因子的浓度。结果:在BALB/c小鼠的研究中:E.m+CMC和C+CMC组相比:TLR2、TLR4、T-bet、GATA3、IFN-γ、 IL-10基因的表达水平不同程度的升高(p=0.046,p=0.021,p=0.753,p=0.074,p=1.000,p=0.462);E.m+ABZ+CMC组与E.m+CMC组相比:TLR2、TLR4、GATA3、IFN-γ、IL-10基因的表达水平不同程度降低(p=0.005,p=0.021,p=0.046,p=0.172,p=0.036),而T-bet的表达水平明显升高(p=0.036)。刀豆蛋白刺激的腹腔灌洗细胞:E.m+CMC和C+CMC组相比:IFN-γ浓度有所降低(p=0.753),而IL-5和IL-10明显升高(p=0.001和p=0.036);E.m+ABZ+CMC和E.m+CMC组相比:IFN-γ、IL-5、IL-10浓度不同程度的降低经(p=0.674,p=0.002,p=0.036)。刀豆蛋白刺激的脾脏细胞:E.m+CMC和C+CMC组相比:IFN-γ、 IL-5、IL-10浓度不同程度的升高(p=0.207,p=0.171,p=0.036);E.m+ABZ+CMC和E.m+CMC组相比:IFN-γ、IL-5、IL-10浓度不同程度的降低(p=0.115,p=0.093,p=0.027)。人体AE的药物治疗:在AE组与Control组相比较:TLR2、TLR4、T-bet、GATA3基因的表达水平和IFN-γ、IL-5、IL-10的血浆浓度有不同程度的升高(p=0.062,p=0.274,p=0.051,p=0.005和p=0.831,p=0.000,p=0.010);AE+ABZ组与AE组患者组相比较:TLR2、TLR4、GATA3基因的表达水平和IL-5、IL-10的血浆浓度大部分降低比较明显(p=0.114,p=0.299,p=0.002和=0.000,p=0.046);而T-bet基因的的表达水平和IFN-γ的浓度有所升高(p=1.000和p=0.561)。结论:1.泡型包虫感染过程中宿主Th1/Th2失衡导致免疫逃避现象,促进棘球蚴可在宿主体内存活更长久。2.ABZ治疗AE的在免疫水平给予证实其治疗过程中可能逆转了Th1/Th2细胞向Th1细胞方向发展,从而增强免疫细胞杀灭棘球蚴的能力。3.本研究中发现ABZ治疗AE过程中提升了Th1相关转录因子和细胞因子水平,降低了Th2相关转录因子和细胞因子,为将来研究治疗AE的免疫方面的药物提供了理论依据。
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