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目的:金黄色葡萄球菌是临床分离的常见细菌之一,可引起皮肤软组织化脓性感染(如疖、痈、蜂窝组织炎等)、肺部感染、伤口感染和血流感染(如败血症)等。本研究检测我院引起皮肤和软组织化脓性感染金黄色葡萄球菌的杀白细胞素(Panton.Valentine leukocidin,PVL)基因,并对PVL阳性株的分子流行病学进行调查。
方法:收集我院2002年12月至2008年6月111株从皮肤和软组织化脓性感染住院患者临床脓液标本中分离的金黄色葡萄球菌,所有菌株均为非重复株。菌种鉴定采用全自动微生物分析仪。金黄色葡萄球菌临床分离株的PVL基因和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin.resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的SCCmec基因分型采用多重PCR。应用多位点基因序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术对PVL阳性菌株进行序列分型,利用脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gelelectrophoresis,PFGE)限制性内切酶对PVL阳性金黄色葡萄球菌进行同源性分析。
结果:111株引起皮肤和软组织化脓性感染的金黄色葡萄球菌中,60株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),51株为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillin sensitive Staphylococcus aureus,MSSA),63株为医院获得株(hospital-acquired),48株为社区获得株(community-associated)。所有临床分离株中26株为PVL基因阳性菌株,阳性率为23.4％(26/111),其中,MRSA株的PVL基因的阳性率为21.7％(13/60),MSSA株PVL基因的阳性率为25.5％(13/51)。26株携带PVL基因的金黄色葡萄球菌根据临床资料分为医院获得性菌株及社区获得性菌株,分别各占13株,分布于11个不同病区,其中医院获得性菌株PVL基因的检出率为20.6％(13/63),社区获得性菌株PVL基因的阳性率为27.1％(13/48)。对26株PVL基因阳性菌株行MLST分析,其中7株为ST88,4株为ST239,ST7检到3株,ST5、ST25、ST398、ST1301和ST1018各检到2株,另外发现两株新的ST型,分别为ST1349和ST1357。26株PVL基因阳性菌株中13株为MRSA株,对其行SCCmec分型得到10株为SCCmecⅢ型,3株为SCCmecⅡ型。26株PVL基因阳性菌株行PFGE分型得到12个不同克隆型,其中A型为4株ST88株,B型为3株ST88株,其余为散在的PFGE型。
结论:
1.在引起皮肤软组织化脓性感染的金黄色葡萄球菌中,社区获得株和医院获得株PVL基因的阳性率均较高,克隆株不仅可以在医院中也可在社区中流行。
2.本研究引起皮肤软组织化脓性感染的金葡菌标本中,MRSA与MSSA的PVL基因阳性率均较高。
3.本研究检到ST239-MRSA-Ⅲ、ST1301和ST7-MRSA-Ⅲ均为医院获得性感染株,ST5-MRSA-Ⅱ和ST25只在社区获得性标本中检到,而ST88-MRSA-Ⅲ和ST1018-MRSA-Ⅲ在社区及院感标本中均有检到。
4.引起皮肤软组织化脓性感染PVL基因阳性菌株检测到两株新的ST型,分别为ST1349和ST1357,均已被Enright教授证实和MLST数据库(www.mlst.net)接受。