【摘 要】
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TRAIL(TNF-relatedapoptosis-inducingligand)是新近发现的TNF超家族成员，与TNF-α和FasL一样能诱导肿瘤细胞发生凋亡。但TNF-α和FasL的细胞毒副反应太大，他们或可引起致命性
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TRAIL(TNF-relatedapoptosis-inducingligand)是新近发现的TNF超家族成员，与TNF-α和FasL一样能诱导肿瘤细胞发生凋亡。但TNF-α和FasL的细胞毒副反应太大，他们或可引起致命性炎症反应，导致脓毒性休克症，或因引起肝细胞凋亡而导致致命性肝损伤，无法应用于临床。TRAIL在多种组织和细胞中广泛表达，有较广的抗癌谱，其在抗癌作用中突出的特征是只选择性诱导肿瘤细胞和转化细胞发生凋亡，而对正常组织和细胞没有显著毒性效应，并且与常规的放疗和化疗有协同增强作用，因而在肿瘤治疗中具有很大的应用前景。
本文在通过正交实验的方法在摇瓶实验基础上对培养TRAIL工程菌的培养基组成进行了优化，并且在此基础上在诱导前分别添加锌离子，氯霉素，增加了TRAIL蛋白的可溶性表达。并使用5L生物反应器进行TRAIL工程菌的发酵培养，每升发酵液含9.76克干菌体,TRAIL表达占34％，上清可溶性部分占16％；将裂菌上清先后过SP-SepharoseFF阳离子交换柱层析和Q-SepharoseFF阴离子交换柱层析，可获取纯度较高(93％)的蛋白，包涵体超声破菌后经两次洗涤纯度达到80％以上，使用快速离心法可以获得95％纯度的纯化蛋白，为以后大规模生产重组TRAIL蛋白打下基础。
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