论文部分内容阅读
背景脑梗死(cerebral infarction)是指某种原因所导致的脑部血液供应障碍,脑组织局部缺血、缺氧性坏死,从而出现相应神经功能缺损的一类临床综合征。脑梗死又称缺血性脑卒中,是脑卒中最常见的类型,约占卒中总发病率的70%~80%。卒中后首先引起局部炎症反应,卒中部位周围的炎症反应对脑组织的损伤要比卒中本身更为严重。近年来,研究发现以核转录因子E2相关因子2(Nuclear factor erythroid 2-related factor,Nrf2)为核心的Nrf2/ARE通路在调控细胞炎症反应中起重要作用。然而Nrf2对缺血性脑卒中的具体作用目前相关报道较少,其具体机制依然不明确。目的对大鼠进行大脑中动脉阻塞以及给予Nrf2激动剂,从而导致Nrf2表达的升高,建立缺血再灌注后Nrf2高表达大鼠模型,观察缺血再灌注大鼠在Nrf2高表达情况下大脑组织促炎性细胞因子(IFN、IL-6)蛋白质表达水平变化以及星形胶质细胞和小胶质细胞活化标记物(GFAP、Iba-1)蛋白质表达水平的变化,并观察Nrf2对脑组织缺血梗死灶面积的变化,分析Nrf2对缺血再灌注机体炎症反应的影响,及在缺血性脑卒中疾病中的作用机制。方法1.将健康成年SD雄性大鼠随机分为正常组、假手术组、卒中梗阻侧组、卒中梗阻对侧组、Nrf2激动剂组、空白溶剂对照组,每组5只。对卒中梗阻侧组、卒中梗阻对侧组、Nrf2激动剂组、空白溶剂对照组大鼠进行大脑中动脉阻塞法(MCAO)手术即卒中手术,手术一天后对Nrf2激动剂组、空白溶剂对照组的卒中大鼠分别进行尾静脉注射Nrf2激动剂和生理盐水。2.造模后3天用western-blot技术检测正常组、假手术组、卒中梗阻侧组、卒中梗阻对侧组大鼠脑组织炎症因子(IL-6、IFN)的表达情况。3.造模后3天用western-blot技术检测假手术组、卒中梗阻侧组、Nrf2激动剂组Nrf2的表达情况。4.造模后3天用western-blot技术检测正常组、假手术组、卒中梗阻侧组、Nrf2激动剂组、溶剂对照组脑组织炎症因子(IL-6、IFN)及小胶质细胞(Iba-1)、星形胶质细胞(GFAP)活化标记物的表达情况。5.运用TTC染色技术观察卒中组大鼠和Nrf2激动剂组大鼠的脑梗死灶体积变化。6.本实验中使用SPSS 20.0软件对实验数据进行分析,计量资料用均数±标准差((?)±S)表示,两组样本比较采用独立样本t检验,多组样本之间比较采用单因素方差(one-way ANOVA)分析,组间两两比较方差齐时采用LSD方法比较,方差不齐时采用Tamhane方法比较,检验结果P<0.05时认为有统计学意义。结果1.手术三天后,卒中梗阻侧组大鼠脑组织的炎症因子(IL-6、IFN)表达水平显著高于正常组、假手术组、卒中梗阻对侧组,P<0.05具有统计学意义。2.卒中梗阻侧组大鼠脑组织Nrf2表达水平显著高于假手术组,P<0.05具有统计学意义。3.Nrf2激动剂组大鼠脑组织的炎症因子(IL-6、IFN)表达水平显著低于卒中梗阻侧组,P<0.05具有统计学意义;胶质细胞活化标记物(Iba-1、GFAP)表达水平显著下降,P<0.05具有统计学意义。4.TTC染色结果显示,Nrf2激动剂组大鼠梗死灶体积显著低于卒中组大鼠,P<0.05具有统计学意义。结论缺血再灌注会诱导大鼠中枢神经系统炎症反应,引起神经系统损伤。Nrf2表达水平升高可通过激活Nrf2/ARE信号通路抑制脑组织中胶质细胞活化,降低炎症水平,从而减小梗死灶的面积,促进梗死脑组织的再灌注,改善脑组织缺血再灌注损伤。