【摘 要】
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为研究中国地方品种猪与外来引进品种猪肌内脂肪沉积差异的分子机制,本试验以大花白猪与长白猪为对象,在猪肉品质分析的基础上,采用Affymetrix公司的基因芯片技术,研究二者之
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为研究中国地方品种猪与外来引进品种猪肌内脂肪沉积差异的分子机制,本试验以大花白猪与长白猪为对象,在猪肉品质分析的基础上,采用Affymetrix公司的基因芯片技术,研究二者之间背最长肌肌内脂肪沉积的基因表达谱,经数据分析得到部分与脂肪沉积有关的差异表达基因。通过荧光定量PCR技术和Western Blot对芯片结果进行验证,并对差异基因IGF-Ⅱ进行功能研究。
结果表明:
(1)大花白猪左侧胴体重、右侧胴体重、体直长、体斜长和眼肌面积均极显著低于长白猪(P＜0.01),肩部最厚处、第六到七肋、胸腰结合处和腰荐结合处背最厚处均极显著高于长白猪(P＜0.01)。大花白猪肌肉pH值下降率较长白猪低3.8％,在肌肉嫩度、肉色的L值和a值均显著高于长白猪(P＜0.05),但感官颜色与大理石纹指标均显著低于长白猪(P＜0.05)。大花白猪肌内脂肪含量显著高于长白猪(P＜0.05),但两品种间滴水损失、干物质、粗蛋白以及脂肪酸含量差异不显著。大花白猪与长白猪的βr、αr和αw肌纤维比例差异不显著,但大花白猪肌纤维面积显著小于长白猪,且密度显著高于长白猪(P＜0.05)。
(2)芯片质控报告显示芯片反应成功,大部分的基因比值在2到-2之间,杂交信号不确定的探针只有1.6％,GO分析可知大部分基因参与生物过程,其次是细胞组成,最后是分子功能。基因芯片聚类图显示,两个品种猪的差异基因较少。差异倍数大于2的基因中,大花白猪较长白猪上调基因25个,其中未知基因18个,已知基因7个;下调基因111个,其中未知基因63,已知基因48个。经荧光定量PCR验证,大花白猪的PDE4B、DGAT2、Elovl6、CYP3A29、CAV1和GPX-1的mRNA表达水平较长白猪的表达量上调,AOOL、IGF-Ⅱ和PGC-1α的mRNA水平较长白猪表达量下调,FABP-4、SCD、FABP-3、AS、Linpin-1、SCAD及CPE的mRNA表达量差异不显著。Western Blot结果显示,两品种猪PGC-1α的蛋白表达与mRNA表达水平相一致,但差异不显著。
(3)采用不同浓度的人源重组IGF-Ⅱ处理猪背最长肌肌内脂肪细胞,结果表明IGF-Ⅱ对肌内脂肪前体细胞的增殖及聚酯均无显著影响。
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